Hoxa10真核表达载体增强K562细胞对柔红霉素敏感度的研究

• 作者: 李建厂 范文文 贾秀红
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: Hoxa10 shRNA 柔红霉素 K562 白血病
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1424-1427
• 分类号: R733.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2012.12.005

摘要

目的 构建高效干扰Hoxa10基因表达的shRNA真核载体,探讨其对人慢性髓系白血病细胞株K562对化疗药物柔红霉素(daunorubicin,DNR)敏感度的影响.方法 设计合成针对Hoxa10的特异性shRNA寡核苷酸链,构建真核表达载体pGPHI/GFP/Neo-Hoxa10并测序,应用阳离子脂质体转染K562细胞.实验分三组:正常对照组、阴性对照组、实验组(分别为正常K562细胞、阴性对照质粒转染K562细胞、pGPHI/GFP/Neo-Hoxa10转染K562细胞),三组细胞均加入不同浓度的DNR.RT-PCR检测Hoxa10 mRNA的表达,应用MTT检测各组细胞对DNR的敏感度,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 成功构建pGPHI/GFP/No-Hoxa10载体并转染K562细胞,该载体能有效降低Hoxa10mRNA表达水平ODR=(38.864±4.488)％；MTT结果显示Hoxa10重组载体可显著降低K562细胞对DNR的IC50 (P＜0.05),对DNR的敏感度能提高约3.58倍.流式细胞术结果显示,该载体下调Hoxa10的表达后,细胞的凋亡率显著增加,可达(16.207±4.891)％ (P＜0.05),且联合DNR后细胞凋亡率明显提高,凋亡率达(76.887±0.967)％ (P＜0.05).结论 本实验构建的靶向Hoxa10的真核表达载体对K562细胞中Hoxa10的表达有明显抑制作用,并能明显增强其对DNR的化疗敏感度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾秀红	滨州医学院附属医院儿科	115	345	8.0	13.0
2	李建厂	滨州医学院附属医院儿科	67	200	6.0	10.0
3	范文文	滨州医学院附属医院儿科	6	10	2.0	2.0