不同刺激因子对小胶质细胞系N9极化的影响

• 作者: 刘芳芳 姚安会 张坤 柳霞 王键 郑晶晶 陈鹏 鞠躬
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脊髓损伤 小胶质细胞 细胞因子
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 87-90
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文

摘要

目的:揭示不同的炎症因子在体外培养的条件下,对小胶质细胞系N9不同极化方向的影响.方法:将小鼠小胶质细胞系N9细胞分为四组:空白对照组(正常培养基)、LPS组、LPS+ INF-γ组、IL-4组.各组细胞在上述刺激条件下培养24h,以及撤去上述刺激条件,继续培养24h后,分别提取各组细胞总RNA,利用荧光实时定量PCR的方法检测各组N9细胞表达的细胞因子在mRNA水平的变化；利用Western blot检测各组N9细胞极化相关蛋白的变化.结果:在LPS以及LPS+ INF-γ刺激条件下培养24h,M1型巨噬细胞特异性标记物iNOS和CD86的mRNA及蛋白表达水平在N9细胞中明显升高,并且LPS+ INF-γ刺激组升高更为明显；而撤除LPS+ INF-γ刺激因子后继续培养24h,N9细胞表达的iNOS和CD86 mRNA的水平均有下调,但仍明显高于对照组.在IL-4刺激条件下培养24h,M2型巨噬细胞特异性标记物Arg1和CD206的mRNA及蛋白表达水平均在N9细胞中明显上调；同样撤除IL-4刺激因子后,继续培养24h,N9细胞表达的ArgⅠ和CD206的mRNA水平均有明显下调,但仍然高于对照组.此时ArgⅠ的蛋白表达变化也与其mRNA水平的变化相符.结论:小胶质细胞的分型分化具有明显的细胞因子依赖性,LPS和LPS+ INF-γ可使N9小胶质细胞向M1型巨噬细胞方向极化；IL-4可促使N9小胶质细胞向M2型巨噬细胞方向极化；LPS与IFN-γ二者在极化N9小胶质细胞中具有协同作用.极化后的N9细胞在去除刺激因子后,仍可在一定程度上维持其极化状态.