摘要:
目的 通过高糖环境培养人心肌细胞( human cardiac myocytes,HCM)建立心肌细胞氧化应激模型,观察脂联素(adiponectin,ADPN)对心肌细胞各氧化应激指标及凋亡的影响,从而揭示脂联素对心肌细胞可能的保护机制.方法 将体外培养的人心肌细胞分为3组:对照组、高糖组、高糖+脂联素组,分别干预24、48、72h.在倒置显微镜下观察心肌细胞形态变化,采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶( superoxide dismutase,SOD)含量.用代巴比妥酸法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,用荧光定量RT - PCR法测定衔接蛋白(adaptinP66Shc)、血红蛋白加氧酶-1( heme oxygenase -1,Ho-1)在各个时间点上的表达,通过流式细胞术检测心肌细胞的凋亡率.结果 与对照组相比,高糖组SOD含量显著下降,MDA含量显著上升(P<0.05),与高糖组相比,脂联素组SOD含量显著上升,MDA含量显著下降(P<0.05),并且呈时间依赖性.与对照组相比,高糖组Ho-1 mRNA表达增高;脂联素组较高糖组表达亦增高(P<0.05).与对照组相比,高糖组P66Shc mRNA表达增高;脂联素组较高糖组表达降低(P<0.05),呈时间依赖性.高糖组细胞凋亡率较对照组明显增加,而脂联素组细胞凋亡率较高糖组显著下降.结论 脂联素可通过减少P66Shc表达、增加Ho -1表达,增加抗氧化能力,减少氧化应激反应,减少细胞凋亡,可能对糖尿病心肌细胞起保护作用.