HRM技术在瘦素基因启动子多态性与肝硬化发生相互关系研究中的应用

• 作者: 刘军 吕宾 孙明洪 孟立娜 徐国萍 曹海军 朱孝鸿 李善高
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 高分辨率熔解曲线分析 瘦素 基因启动子 基因多态性 肝硬化
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1308-1313
• 分类号: R446.9
• 字数: 4085字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2012.07.029

摘要

目的:探讨PCR-高分辨率熔解曲线分析(HRM)技术筛选和分析肝硬化患者瘦素基因启动子C2549和G2548位点突变的可能性,同时研究突变基因型与肝硬化患者生理生化指标之间的关系.方法:采用PCR-HRM新型技术,同时对比传统方法PCR-限制性片段长度多态性分析(RFLP),对对照组(n=100)和肝硬化组(n=100)瘦素基因启动子C2549和G2548位点突变进行分析,同时检测生理生化指标.结果:(1)PCR-HRMA技术能够有效、高通量、准确地实现对瘦素基因启动子多态性的检测; (2)肝硬化患者瘦素基因启动子主要突变位点在C2549,而G2548位点没有发现突变;(3)肝硬化组中瘦素、游离瘦素指数(FLI)、空腹胰岛素(FINS)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)高于对照组,胰岛素敏感指数(ISI)及可溶性瘦素受体(sOB-R)低于对照组,除瘦素外,均有显著差异(P<0.05);FLI与FINS和HOMA-IR呈正相关(r=0.45、r=0.53,均P<0.05),与ISI呈负相关(r=-0.34,P<0.05);(4)肝硬化患者C2549杂合型占优势,肝硬化纯合型和杂合型突变个体中 HOMI-IR、瘦素、sOB-R及FLI均高于野生型,除瘦素及sOB-R外均有显著差异(P< 0.05).结论:PCR-HRM能准确及高通量地实现对瘦素基因启动子多态性进行分析,并验证了A位点基因频率的增高可能和肝硬化发生有关;肝硬化患者存在高胰岛素血症及胰岛素抵抗,瘦素可能与肝硬化患者胰岛素抵抗发生有关.