重组AQP9对L-02细胞脂质沉积的影响

• 作者: 姜政 王丕龙 王川 袁媛
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 水甘油通道蛋白9 非酒精性脂肪肝病 重组质粒 基因治疗
• 年，卷（期）: 2012,（17）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1722-1726
• 分类号: R394-33|R392.4|R575.5
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人水甘油通道蛋白9( aquaglyceroporin9,AQP9)重组质粒,验证其在L-02肝细胞中的表达,并检测其对非酒精性脂肪肝病( nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)细胞模型的作用.方法 从人肝脏组织中提取总RNA,RT-PCR获得AQP9基因,克隆到载体pEGFP-N1上,构建重组质粒pEGFP-N1-AQP9.将其转染L-02细胞,通过荧光显微镜观察其转染情况,RT-PCR和Western blot检测AQP9基因在细胞中的表达.通过油红O染色,测定甘油三酯、游离脂肪酸及甘油含量,检测其对L-02细胞脂肪变性模型的作用.结果 成功构建pEGFP-N1-AQP9重组质粒,并能在L-02细胞中表达,将其转染L-02细胞脂肪变性模型后,油红O染色可见油酸/pEGFP-N1-AQP9转染组较油酸组细胞内脂质含量明显升高,油酸/pEGFP-N1-AQP9转染组细胞内甘油三酯、游离脂肪酸及甘油含量分别为(5.435±0.337)、(2.016±0.144)、(1.485 ±0.113) mmol/L,而油酸组分别为(3.218 ±0.220)、(1.538±0.193)、(1.024±0.148) mmol/L,两者之间差异有统计学意义(P＜0.01),说明上调AQP9表达量可使其脂肪变性程度加重.结论 AQP9异常升高能够引起或加重非酒精性脂肪肝病.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丕龙	重庆医科大学附属第一医院消化内科	151	971	16.0	24.0
2	姜政	重庆医科大学附属第一医院消化内科	117	472	10.0	15.0
3	王川	重庆医科大学附属第一医院消化内科	15	49	5.0	5.0
4	袁媛	重庆医科大学附属第一医院消化内科	6	24	3.0	4.0