脑源性神经生长因子经自噬对胚鼠神经元缺氧损伤的保护作用

• 作者: 周晖 毛萌 童煜 陈艾
• 来源期刊: 实用儿科临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脑源性神经生长因子 氧气剥夺 神经元 自噬 自噬微管相关蛋白轻链3
• 年，卷（期）: 2012,（17）
• 所属期刊栏目: 小儿神经基础与临床
• 页码范围: 1351-1354
• 分类号: R729
• 字数: 3951字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-515X.2012.17.018

摘要

目的 探讨脑源性神经生长因子(BDNF)对胚鼠缺氧神经元是否有保护作用及其机制是否与激活自噬有关.方法 将SD大鼠胚鼠(孕17 ～ 19 d)的大脑皮质神经元在体外进行原代细胞培养,并进行神经元鉴定.培养7～10d,选取生长良好的神经元用于前后两部分实验.1.第一部分随机分为3组,对照组:不加入药物,只作缺氧处理；3-甲基腺嘌呤组(3-MA组):提前加入不同浓度的3-MA后作缺氧处理,依次为5 mmol·L-1 3-MA组、10 mmol·L-1 3-MA组、20 mmol·L-1 3-MA组；BDNF组:提前加入不同浓度的BDNF后作缺氧处理,依次为50μg· L-1 BDNF组、100 μg·L-1 BDNF组、200 μg·L-1 BDNF组.观察不同剂量3- MA、BDNF对缺氧神经元损伤的作用.之后以细胞计数盒-8(CCK-8)测定各组细胞活力,确定干预缺氧神经元的最佳药物浓度.2.第二部分分为3组,对照组:单纯缺氧,不加药物；100 μg·L-1 BDNF组:加入100 μg·L-1BDNF;10 mmol·L-1 3-MA组:加入10 mmol·L-1 3-MA.免疫蛋白印迹法检测3组缺氧神经元在不同缺氧时间点细胞自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达情况,以LC3Ⅱ/actin的相对表达量判断自噬发生的程度.结果 1.免疫荧光鉴定:与未缺氧神经元比较,缺氧神经元突触回缩,细胞网状结构被破坏.2.神经元细胞活力:50 μg·L-1BDNF组缺氧神经元细胞活力最强,100 μg·L-1BDNF组缺氧神经元细胞活力其次(Pa＜0.05)；随3-MA剂量加大,各剂量组神经元活力明显降低.3.免疫印迹:于缺氧1h、3h、5h,100 μg·L-1 BDNF组缺氧神经元的LC3表达量,均较对照组相应时间点明显上调(Pa＜0.05).结论 BDNF通过自噬途径对缺氧损伤神经元起保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毛萌	四川大学华西第二医院儿科	141	1161	17.0	26.0
2	周晖	四川大学华西第二医院儿科	30	268	11.0	15.0
3	陈艾	四川大学华西第二医院儿科	2	10	1.0	2.0
4	童煜	四川大学华西第二医院儿科	24	119	8.0	9.0