环介导等温扩增技术检测间日疟原虫方法的建立及应用分析

• 作者: 卢伟 张小萍 张耀光 江莉 洪国宝 王文静 王真瑜 蔡黎
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 环介导等温扩增技术 间日疟原虫 基因检测
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究论著
• 页码范围: 157-161
• 分类号: R382.31
• 语种: 中文

摘要

目的 建立一种快速、简便的检测间日疟原虫的环介导等温扩增方法(LAMP)并与常规PCR方法作比较.方法 根据间日疟原虫环子孢子蛋白(CSP)基因序列合成2对特异性LAMP引物,优化Mg2+浓度、dNTPs浓度、Bst DNA聚合酶添加量、反应温度、时间以及设计引物缺省试验.评估优化后的LAMP反应的特异性和灵敏性.检测133份患者血样,以显微镜检方法为金标准,比较LAMP和多重PCR法检测间日疟原虫的敏感性和特异性.结果 LAMP法检测重组质粒DNA(Pv-rDNA)的灵敏度达到10-10,为传统PCR方法的100倍.镜检确诊的68例间日疟、43例恶性疟和22例非疟疾患者中,LAMP法和多重PCR检测间日疟原虫的敏感性为98.53％和97.06％,两法基本相当(x2=0.34,P＞0.05)；特异性为86.15％和100％,LAMP法低于多重PCR法,差异有统计学意义(x2=9.67,P＜0.05).LAMP法的阳性预测值和阴性预测值分别为88.16％和98.25％,多重PCR的阳性预测值和阴性预测值分别为100％和97.01％.结论 LAMP法检测间日疟原虫具有快速简便、敏感性高、设备要求低的特点,具有较好的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王文静		78	489	11.0	17.0
2	蔡黎		67	498	12.0	19.0
3	卢伟		116	1844	25.0	37.0
4	王真瑜		18	110	7.0	9.0
5	江莉		19	99	7.0	9.0
6	张耀光		20	98	6.0	9.0
7	洪国宝		4	26	3.0	4.0
8	张小萍		31	213	8.0	13.0