脂多糖预处理对GSK-3功能活性的影响

• 作者: 余正 张艳 徐发良 熊弢 陈太忠 龚建平
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 脂多糖 内毒素耐受 糖原合成酶激酶-3 肝损伤
• 年，卷（期）: 2012,（13）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1304-1309
• 分类号: R329.26|R345|R364.5
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨脂多糖( lipopolysaccharide,LPS)耐受和精原合成酶激酶-3(glycogen synthase kinase 3,GSK-3)抑制剂对其功能活性的影响.方法 雄性健康SD大鼠36只,随机数字表法分为对照组(NC)、LPS耐受组(ET)和LiCl处理组(LiCl),每组12只；LPs耐受组(ET)于第1、2、3天接受0.015、0.030和0.060mg/kgLPs腹腔注射；LiCl处理组(LiCl)同样时间点腹腔注射2.5 mol/L LiCl 0.25 ml,饮水含3 mmol/L LiCl；对照组每天腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS)0.25 ml;处理结束后每组再按是否接受致死量LPS( 10 mg/kg)攻击而分为LPS攻击前和LPS攻击后2个亚组,LPS攻击后组按10 mg/kg腹腔注射LPS,LPS攻击前亚组等体积的PBS腹腔注射,12 h后取材.按照[γ-32P]放射性掺入法、用液体闪射仪检测肝组织GSK-3激酶总活性,RT-PCR法检测GSK-3α、GSK-3β mRNA表达,Western blot法分析GSK-3α/β、pGSK-3α/β蛋白表达,考马斯亮蓝法测定Calpain活性,激光共聚焦显微镜下观察GSK-3亚细胞定位状况.结果 LPS攻击后ET组GSK-3活性显著低于NC组LPS攻击前水平[(1311±57),P=0.023 5],其他各组在LPS攻击前后差异无显著性.LPS耐受、LiCl预处理和LPS攻击未导致GSK-3α和β的mRNA表达变化和GSK-3α和β的总蛋白表达变化(P＞0.05).LPS攻击前,NC、ET和LiCl组GSK-3α磷酸化无显著增加(P＞0.05),但LPS攻击后,LiCl组GSK-3α磷酸化显著增加[(3.07±0.62),P＜0.05].LPS攻击前,ET和LiCl组GSK-3β磷酸化比NC组显著增加[ET( 1.49±0.26)；LiCl(2.05±0.43),P＜0.05]；但LPS攻击后,只有LiCl组GSK-3β磷酸化显著增加[(1.54±0.32),P＜0.05].同时,LPS耐受动物经大剂量LPS攻击后肝组织GSK-3α严重降解.LPS攻击导致各组与LPS攻击前比较Calpain显著升高[NC(2.78±0.53)；ET(2.45±0.22)；LiCl(2.39±0.86),P＜0.05],但组间比较没有显著差异(P＞0.05).GSK-3亚细胞定位分析,LPS耐受时胞核内聚集的GSK-3减少,并主要集中于细胞质内；在不同浓度LiCl刺激下,胞核GSK-3也可减少,但不显著；在大剂量LPs攻击下,胞核GSK-3减少,主要集中于细胞质内和胞核周围.结论 LPS耐受和GSK-3抑制剂LiCl预处理均可导致GSK-3功能活性改变,但影响和机制并不完全相同,LPS耐受的机制可能与抑制GSK-3激酶活性、诱导GSK-3磷酸化、促进GSK-3α裂解并诱导GSK-3从胞核向细胞质转移有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张艳	重庆医科大学附属第二医院肝胆外科	39	187	8.0	11.0
2	龚建平	重庆医科大学附属第二医院肝胆外科	438	2018	18.0	27.0
3	余正	重庆医科大学附属永川医院普外科	10	80	4.0	8.0
4	陈太忠	重庆医科大学附属永川医院普外科	11	59	3.0	7.0
5	熊弢	重庆医科大学附属永川医院普外科	8	13	2.0	2.0
6	徐发良	重庆医科大学附属第二医院肝胆外科	4	34	3.0	4.0