腺病毒介导的NELL1基因对小鼠成骨细胞增殖分化的影响

• 作者: 卢世璧 张新立 张莉 彭江 汪爱媛 王玉 薛静 袁玫 许文静 郭全义 郭旭
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: NELL1 成骨细胞 定量PCR
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 509-511
• 分类号: R336
• 字数: 1950字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨重组腺病毒(Ad-GFP-NELL1)介导的NELL1因子对小鼠成骨细胞(MC3T3E1)增殖、分化及OCN(骨钙素)和OPN(骨桥蛋白)基因表达的影响.方法 免疫荧光染色鉴定重组腺病毒(Ad-GFP-NELL1)转染细胞后绿色荧光蛋白(GFP)及NELL1的表达；不同转染滴度Ad-GFP-NELL1转染MC3T3E1细胞,荧光显微镜下观察转染效果；将MC3T3E1细胞分为对照组,NELL1组(Ad-GFP-NELL1转染)和GFP组(Ad-GFP转染),利用CCK-8试剂盒检测并绘制生长曲线；观察和计量茜素红染色后钙结节数目；定量PCR检测成骨相关基因OCN,OPN表达的改变.结果 免疫荧光显示Ad-GFP-NELL1转染大鼠骨髓基质干细胞72h后能同时表达NELL1和GFP；在最佳转染滴度200pfu/cell转染条件下,Ad-GFP-NELL1及Ad-GFP对MC3T3E1细胞增殖没有明显影响(P＞0.05).NELL1组细胞钙结节数目(7±2)比空白对照组(2±1)及Ad-GFP组(2±1)明显增多(P＜0.05),OCN(3.7倍),OPN(5.1倍)的表达也明显上升.结论 Ad-GFP-NELL1转染MC3T3E1细胞后能有效促进细胞的成骨分化作用,且对其增殖无明显毒性作用.