RNA干扰PDK-1对5-FU诱导结肠癌细胞凋亡的促进作用

• 作者: 何金霞 梁后杰 童晶涛 谢赣丰
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠肿瘤 丙酮酸脱氢酶激酶-1 细胞增殖 化学治疗 凋亡
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 9-12
• 分类号: R394-33|R730.23|R735.35
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨以丙酮酸脱氢酶激酶-1(pyruvate dehydrogenase kinase isozyme 1,PDK-1)为靶标的短发夹RNA(shRNA)与化疗药5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人结肠癌LS174T细胞的促凋亡作用.方法 针对PDK-1序列设计3段干扰序列及1个阴性对照,分别构建pGenesil.1-PDK-1重组质粒表达载体及pGenesil.1-NC阴性对照载体,利用脂质体分别将质粒转染入LS174T,并用G418对细胞进行药物筛选,并通过Real-time PCR和Western blot检测有干扰序列的有效性.MTT实验检测5-FU对干扰组和对照组细胞生长、增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 Real-time PCR 和Western blot证实3个干扰组均抑制PDK-1表达,其中最大敲减效率超过70％.MTT实验结果显示,经5-FU同样处理48 h后,PDK-1干扰的LS174T细胞生长抑制率较对照组显著增高(P＜0.05)；流式细胞仪结果显示,干扰组细胞凋亡率较对照组增高(P＜0.05).结论 PDK-1 shRNA能特异性下调LS174T细胞中PDK-1的表达,PDK-1干扰联合5-FU可促进结肠癌细胞化疗诱导凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁后杰	第三军医大学西南医院肿瘤科	197	911	14.0	18.0
2	谢赣丰	第三军医大学西南医院肿瘤科	13	48	4.0	6.0
3	童晶涛	第三军医大学西南医院肿瘤科	7	33	4.0	5.0
4	何金霞	第三军医大学西南医院肿瘤科	3	9	2.0	3.0