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摘要:
目的 构建携带人金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)的重组腺病毒Ad-人TIMP1(hTIMP1),将其感染用同型半胱氨酸(Hcy)刺激的人脐静脉内皮细胞CRL-1730,观察该细胞基质金属蛋白酶(MMP)1、MMP9、TIMP1mRNA的表达变化.方法 在大肠杆菌BJ5183中通过同源重组构建重组腺病毒Ad-hTIMP1和对照重组腺病毒Ad-Track.将CRL-1730细胞分为空白对照组、Track对照组和基因治疗组,并根据加入Hcy浓度的不同各分为三个亚组,即空白对照组、生理浓度组和病理浓度组.病毒感染48 h后加入Hcy刺激,6h后收集各组CRL-1730细胞,RT-PCR法检测CRL-1730细胞中的MMP1、MMP9、TIMP1 mRNA.结果 Ad-hTIMP1和Ad-Track的滴度分别为1.9×1012 VP/mL和0.6×1012 VP/mL.基因治疗组Ad-hTIMP1感染CRL-1730细胞后,该细胞的TIMP1 mRNA表达明显高于空白对照组(P<0.05),即使加入病理浓度的Hcy,CRL-1730细胞中TIMP1 mRNA的表达仍处于高水平,而MMP1、MMP9 mRNA的表达明显降低(P均<0.05).结论 成功构建了Ad-hTIMP1和Ad-Track.重组腺病毒Ad-hTIMP1感染CRL-1730细胞后,该细胞中TIMP1 mRNA过表达,可抑制高浓度Hcy刺激造成的MMP1、MMP9 mRNA的表达升高,提示其可对抗Hcy对内皮细胞的损伤.
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篇名 Ad-hTIMP1感染对Hcy刺激人脐静脉内皮细胞MMP1、MMP9、TIMP1 mRNA表达的影响
来源期刊 山东医药 学科 医学
关键词 腺病毒 金属蛋白酶组织抑制剂 基质金属蛋白酶 同型半胱氨酸 基因疗法
年,卷(期) 2012,(42) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 11-14
页数 4页 分类号 R34|R541.4
字数 3581字 语种 中文
DOI
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1 王佩显 133 596 12.0 18.0
2 李汇 16 33 4.0 4.0
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4 崔让庄 53 208 7.0 11.0
5 赵莉莉 18 37 4.0 4.0
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腺病毒
金属蛋白酶组织抑制剂
基质金属蛋白酶
同型半胱氨酸
基因疗法
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山东医药
周刊
1002-266X
37-1156/R
大16开
济南市燕东新路6号
24-8
1957
chi
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