靶向抑制EGFR联合阻断Hedgehog信号通路对胰腺癌细胞增殖的影响及机制

• 作者: 杨尹默 田孝东 秦昌富 郝昆
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 表皮生长因子受体 Hedgehog 胰腺肿瘤 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2012,（26）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1849-1853
• 分类号: R542.2
• 字数: 4436字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2012.26.014

摘要

目的 观察靶向抑制表皮生长因子受体(EGFR)联合阻断Hedgehog信号通路对胰腺癌细胞增殖及凋亡的协同作用,探讨二者间的协同作用机制.方法 设计并合成针对人EGFR基因特异性siRNA,构建慢病毒pFU-GW-RNAi载体,感染人胰腺癌Panc-1细胞,获得稳定转染细胞株.Real time PCR检测Shh和Gli1的表达情况；克隆形成实验和MTT法检测细胞增殖情况；流式细胞技术检测细胞凋亡情况；Western印迹方法检测ERK和AKT磷酸化水平变化；裸鼠移植瘤模型检测移植瘤生长抑制情况.结果 慢病毒介导的RNAi显著抑制Panc-1细胞EGFR的表达；靶向抑制EGFR后Panc-1细胞对环巴明的敏感性显著增加,细胞增殖能力下降,其半数抑制剂量(IC50)从(2.978±0.336) μmol/L下降到(1.698士0.057)μmol/L,P＜0.05;联合处理组细胞早期凋亡比率高达38.75％,显著高于单独抑制EGFR组(17.65％)及对照组(3.02％),P＜0.05；裸鼠移植瘤实验结果显示联合处理组移植瘤体积(394.8±87.5)mm3显著低于抑制EGFR组(594.7士86.1)mm3和单独应用环巴明处理组(771.3±82.9) mm3；克隆形成实验结果显示联合处理可以进一步抑制细胞增殖；抑制EGFR后胰腺癌细胞ERK和AKT磷酸化水平较对照组显著降低,联合应用环巴明处理后二者磷酸化水平均进一步下降.结论 靶向抑制EGFR联合环巴明处理后胰腺癌细胞体内外增殖能力均进一步被抑制,细胞凋亡率进一步增加；其协同机制可能部分与调控ERK和AKT磷酸化水平相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨尹默	北京大学第一医院普外科	232	1046	15.0	21.0
2	郝昆	北京大学第一医院普外科	7	42	3.0	6.0
3	田孝东	北京大学第一医院普外科	84	371	10.0	14.0
4	秦昌富	北京大学第一医院普外科	4	29	3.0	4.0