HCV协同感染因子La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白和真核细胞翻译起始因子第三亚单位特异性siRNAs的筛选

• 作者: 傅晓晴 徐斌 段瑾 王美霞 金铭
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA La自身抗原 33kDa人类囊相关膜蛋白 真核细胞翻译起始因子第三亚单位
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 45-49
• 分类号: R
• 字数: 2734字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-548X.2012.05.015

摘要

目的 筛选Huh7细胞内La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白(hVAP -33)和真核细胞翻译起始因子第三亚单位(eIF2Bgamma)的特异性siRNAs.方法 根据Genebank中的序列设计3种基因的特异性引物,在Huh7细胞中通过荧光定量PCR方法检测上述3种分子；根据siRNA设计原则针对每种基因设计合成3条siRNAs；分别将不同序列siRNA转染Huh7细胞,利用荧光定量PCR方法并计算△△CT值筛选出针对每种基因抑制效率最高的一条siRNA.结果 荧光定量PCR方法检测到了上述3种分子的存在；每种基因的3条不同siRNA对相应基因具有不同程度的沉默作用,通过△△CT值的计算找出其中效率最高的一条.结论 Huh7细胞内可以检测到La自身抗原、hVAP - 33和eIF2Bgamma基因,其特异性siRNAs可以沉默相应基因表达.