甘草鲨烯合酶基因多态性对其编码酶催化效率影响的研究

• 作者: 刘春生 刘颖 张宁 文浩 王学勇 陈宏昊
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 甘草 SQS 基因多态性 单核苷酸多态性 插入与缺失多态性 选择性剪接 原核表达 GC-MS 鲨烯
• 年，卷（期）: 2012,（24）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 3777-3783
• 语种: 中文
• DOI: 10.4268/cjcmm20122420

摘要

目的:分析甘草鲨烯合酶(squalene synthase,SQS)基因多态性及其对编码酶催化效率的影响,为揭示优质甘草形成的分子机制奠定基础.方法:提取甘草总RNA; PCR扩增其SQS基因编码序列；测序后分析SQS序列的多态性；将具有明显差异的4个甘草SQS序列(SQS1C,SQS1F,SQS2A,SQS2B)连入表达载体pET-32a(+),转化大肠杆菌BL21；IPTG诱导蛋白表达,纯化后用于体外酶促反应；GC-MS鉴定产物并比较相对含量.结果:甘草SQS1基因存在单核苷酸多态性(single nuclear polymorphisms,SNPs)、插入与缺失多态性(InDel)、选择性剪接(AS)多态性；SQS2基因只存在SNPs.氨基酸序列分析显示,SQS1非保守替换占53.94％,结构域中有2个位点突变；SQS2非保守替换占60％,结构域中有1个位点突变.在4种编码酶的体外酶促反应中,利用GC-MS均能检测到产物生成；SQS1F编码酶积累鲨烯的能力高于其他序列.结论:甘草SQS基因具有丰富的多态性,其编码酶催化效率差异显著,这可能是优质甘草形成的分子基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘颖	北京中医药大学中药学院	105	760	12.0	24.0
2	刘春生	北京中医药大学中药学院	159	1169	18.0	27.0
3	王学勇	北京中医药大学中药学院	34	336	12.0	17.0
4	张宁	北京中医药大学中药学院	22	81	4.0	8.0
5	陈宏昊	北京中医药大学中药学院	7	24	3.0	4.0
6	文浩	北京中医药大学中药学院	5	19	2.0	4.0