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摘要:
目的 构建Survivin 基因特异性小干扰RNA(siRNA),检测siRNA-Survivin对Survivin基因表达的抑制,在人肝癌细胞株HepG2中研究 survivin和 survivin siRNA 对细胞凋亡的影响.方法 设计survivin siRNA序列,构建靶向 Survivin siRNA 真核载体.利用脂质体转染人肝癌HepG2细胞,通过相差显微镜下观察、四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察转染后survivin的表达,以及HepG2细胞的凋亡.结果 成功构建了survivin siRNA表达载体,并且si-survivin对survivin有明显抑制效应,可显著抑制HepG2细胞的发生凋亡.转染Survivin-siRNA 细胞活性受到显著抑制(P<0.05),光镜下出现明显的凋亡形态,DNA电泳出现典型的凋亡"梯状"带.RT-PCR 结果显示细胞转染24 h、48 h和72 h 后HepG2 Survivin mRNA 分别减少了56%、78%和50%,而siRNA 阴性对照与未转染细胞相比差异不显著.结论 转染的Survivin-siRNA 可特异性抑制肝癌细胞株HepG2凋亡抑制基因的表达,从而为肿瘤的基因治疗提供新的实验基础.
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survivin基因
反转录聚合酶链反应
序列测定
细胞株
内容分析
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文献信息
篇名 小干扰RNA对人肝癌细胞株HepG2Survivin基因表达的影响
来源期刊 临床和实验医学杂志 学科 医学
关键词 Survivin基因 HepG2细胞 小干扰RNA 基因表达 检测
年,卷(期) 2012,(7) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 484-486,封3
页数 分类号 R735.7
字数 2321字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1671-4695.2012.07.002
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张亚历 南方医科大学南方医院消化病研究所 121 704 15.0 21.0
2 李瑜元 广州医学院附属第一人民医院消化内科 81 631 14.0 21.0
3 聂玉强 广州医学院附属第一人民医院消化内科 73 563 13.0 19.0
4 周殿元 南方医科大学南方医院消化病研究所 27 207 9.0 13.0
5 沙卫红 广州医学院附属第一人民医院消化内科 21 192 7.0 13.0
6 薛净 武警北京总队医院内一科 9 36 3.0 6.0
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Survivin基因
HepG2细胞
小干扰RNA
基因表达
检测
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临床和实验医学杂志
半月刊
1671-4695
11-4749/R
大16开
北京市西城区永安路95号(通讯地址:北京市100176-25信箱)
80-494
2002
chi
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