梅毒血清学诊断用抗原Gpd蛋白的重组表达及鉴定

• 作者: 俞辉 刘忠民 林勇平 陆中奎
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 关键词: 梅毒 重组Gpd蛋白 基因工程 血清学诊断
• 年，卷（期）: 2012,（14）
• 所属期刊栏目: 基础实验研究论著
• 页码范围: 1665-1667
• 页数: 3页
• 字数: 2828字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2012.14.001

摘要

目的 利用基因工程技术重组表达梅毒螺旋体Gpd蛋白,探讨其在梅毒血清学诊断中的应用.方法 PCR扩增Gpd基因序列,构建表达载体pET-28b-Gpd,将表达载体转化感受态细胞E.coli BL21(DE3)并以IPTG诱导蛋白表达,经镍柱亲和层析纯化后,利用质谱和免疫印迹法鉴定重组蛋白.以重组蛋白建立间接ELISA法,并检测20份TPPA阳性和20份TPPA阴性血清去评价其在梅毒血清学诊断中的应用.结果 PCR扩增出约1.1 kb的Gpd片段,成功构建重组质粒pET-28b-Gpd.表达的重组蛋白的相对分子质量约41×103,主要以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的40%.质谱和免疫印迹分析证实重组蛋白为Gpd蛋白,并能够与梅毒患者血清发生免疫学反应.间接ELISA法测定TPPA阳性血清和TPPA阴性血清的符合率分别为95%(19/20)和100%(20/20).结论 重组Gpd蛋白能够与梅毒患者血清发生特异性的免疫学反应,是一种可潜在应用于梅毒血清学诊断的新抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘忠民	广州医学院第一附属医院检验科	52	305	9.0	14.0
2	陆中奎	广东省佛山市顺德区龙江医院检验科	4	5	2.0	2.0
3	林勇平	广州医学院第一附属医院检验科	52	264	10.0	14.0
4	俞辉	广州医学院第一附属医院检验科	5	7	1.0	2.0