PCR和毛细管电泳技术检测沙门氏菌等5种病原菌的方法研究

• 作者: 凌霞 孙纳 张敬平 沙丹 管红霞 肖勇
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 多重PCR 振荡培养 毛细管电泳 食品检验
• 年，卷（期）: 2012,（14）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 3611-3614
• 分类号: R378.2+2
• 语种: 中文

摘要

目的 采用多重PCR技术检测结合毛细管电泳成像技术建立快速检测沙门氏菌、志贺氏菌、副溶血性弧菌金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157的方法.方法 根据沙门氏菌hilA基因、志贺氏菌ipaH基因、副溶血性弧菌TDH基因、金黄色葡萄球菌的pSa-442 Sau3AI fragment基因及大肠杆菌O157的rfbE基因设计异性特PCR引物,被检样品经4h振荡培养后金属浴裂解制备DNA模板,使用全自动毛细管电泳核酸检测系统分析PCR扩增产物.结果 在580 bp、423bp、257 bp、245 bp和194 bp处分别出现预期的特异性DNA条带,且无非特异扩增条带出现.敏感性试验显示在模拟标本中的检测灵敏度,沙门氏菌为101-2 cfu/ml、志贺氏菌为101 cfu/ml、副溶血性弧菌为102 cfu/ml、金黄色萄萄球菌为102 cfu/ml、大肠杆菌O157为101 cfu/ml.结论 该方法操作方便、特异性和灵敏度高、分辨率高,可同时完成5种病原菌的检测,在公共卫生突发事件中具有实用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	凌霞		28	160	7.0	10.0
2	张敬平		41	364	11.0	16.0
3	肖勇		33	195	8.0	12.0
4	孙纳		9	52	3.0	7.0
5	沙丹		17	84	6.0	8.0
6	管红霞		9	41	4.0	6.0