健康人外周血树突状细胞体外培养及表型鉴定

• 作者: 刘宝 张蕾 王锦权 莫宝定 陈剑 陶晓根
• 来源期刊: 临床和实验医学杂志
• 关键词: 树突状细胞 细胞培养 密度梯度离心法 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2012,（23）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1837-1838,1842
• 页数: 3页
• 字数: 2599字
• 语种: 中文

摘要

目的 分离人外周血单个核细胞,经体外诱导培养获取成熟树突状细胞(DC),并对树突状细胞表型表达鉴定,为进一步研究DC功能提供基础.方法 取健康成人新鲜外周血,经密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞,2 h贴壁后加入粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素(IL)-4,第6天加入肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激DC成熟,倒置显微镜观察每日细胞形态;分别于第1天、第6天、第8天用流式细胞仪对其进行表型鉴定;同种异体混合淋巴细胞反应观察对T细胞的抗原提呈能力 倒置显微镜下DC细胞形态不规则,表面有毛刺状突起,呈DC典型形态学特征;成熟DC细胞表面CD1a、CD80、CD83、人类白细胞抗原(HLA)-DR表达明显增加,混合淋巴细胞反应OD值增加.结论 用GM-CSF、IL-4和TNF-α可以诱导健康成人外周血单个核细胞,培养出成熟的DC细胞,为进一步研究DC功能提供基础.