微生物酶基因克隆与表达的初步尝试

• 作者: 于琛
• 来源期刊: 海峡药学
• 学科: 医学
• 关键词: α-葡萄糖转苷酶 克隆 表达 酶活
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 257-259
• 分类号: R969.4
• 字数: 3601字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3765.2012.02.143

摘要

目的 探索微生物酶基因的克隆与表达,为新药的开发和利用寻找新途径.方法 以黑曲霉M-1菌株总RNA为模板,通过RT-PCR扩增,将扩增后的α-葡萄糖转苷酶CDNA重组到载体pSE380中构建重组质粒pSE-atg,并由其将此酶基因导入大肠杆菌BL21(DE7),通过IPTG诱导剂诱导表达目的蛋白.结果 黑曲霉M-1菌株总RNA适合作反转录PCR的模板；目标酶cDNA己正确连接到pSE380质粒上、并通过此质粒转移至大肠杆菌BL21(DE7)成功实现重组,且在重组大肠杆菌上的酶基因表达无误.结论 α-葡萄糖苷酶基因能被成功克隆与表达,这为新药的开发和利用开僻了一条新思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于琛	浙江嘉兴中医医院药剂科	5	21	3.0	4.0