乙型肝炎病毒的液相杂交技术在聚合酶链反应酶联免疫检测的应用探讨

• 作者: 夏丽娜
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 液相杂交 聚合酶链反应 酶联免疫检测法
• 年，卷（期）: 2012,（17）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 4525-4527
• 分类号: R373.2+1
• 语种: 中文

摘要

目的 利用液相杂交技术,将核酸杂交技术进行简化,建立乙型肝炎病毒(HBV)的液相杂交的聚合酶链反应酶联免疫检测(PCR-ELISA)方法.方法 以HBV为目的靶DNA,引物P15'端标记Bio-PCR扩增37个循环.PCR扩增产物与5’端标记地高辛的探针呈液相混合,85cC 2.5 min,60C1 min进行杂交,杂交后产物均经过链霉素亲和素酶标板进行固定,经过酶标仪记录抗地高辛标记抗体,结合、显色.结果 液相杂交酶联免疫检测条件的优化:地高辛的探针浓度为2.4 pmol/次,液相杂交时间为2.5min,固相杂交时间为100 min,检测结果差异无统计学意义(P＞0.05)；本试剂对87份“HBsAg+、HbeAg+、抗HBc+”标本的阳性检出率为91.95％; 72例“HBsAg+、抗-Hbe+、抗HBc+”标本的阳性检出率为68.06％,其他免疫检测指标组合标本为16份.结论 HBV的液相杂交技术应用于聚合酶链反应酶联免疫检测(PCR-ELISA),该杂交技术的实验操作简便,快速,适合于临床实验室的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏丽娜	河南省漯河市中心医院检验科	4	5	1.0	2.0