shRNA特异性静默大鼠肺泡巨噬细胞TLR2基因对染尘大鼠肺纤维化的抑制作用

• 作者: 周韶炜 张意 邵伯棕 陈宣辰
• 来源期刊: 中国工业医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 矽肺 Toll样受体2(TLR2) 短发夹RNA (shRNA) 肺泡巨噬细胞 转化生长因子β1(TGF-β1) 白介素-1β (IL-1β) 白介素6(IL-6)
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 88-91,101
• 页数: 5页
• 分类号: R994.3
• 语种: 中文

摘要

目的 构建表达大鼠TLR2的shRNA慢病毒载体,并研究其在染尘大鼠肺组织内对巨噬细胞功能的抑制效应.方法 设计并构建具有干扰效力的shRNA表达质粒,筛选出对TLR2干扰效果最好的一段序列,使用Gateway方法重组到慢病毒表达载体中进行包装,采用包装好的慢病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383,ELISA法检测TGF-β1、IL-1β、IL-6的表达情况；而后,在大鼠矽肺模型中引入TLR2慢病毒载体,观察矽肺发生和进展情况.结果 成功筛选出具有良好TLR2表达干扰效果的shRNA,并成功包装入慢病毒,慢病毒滴度为1.0×106TU/ml,转染慢病毒的肺泡巨噬细胞释放TGF-β1、IL-1β、IL-6均显著减少(P＜0.05)；转导了干扰病毒载体的矽肺大鼠,其矽肺发生发展受抑情况均优于对照组.结论 成功构建了表达大鼠TLR2 shRNA的慢病毒,具有良好的抑制TGF-β1、IL-1β、IL-6功能,并能有效抑制矽肺的发生发展,揭示TLR2可能成为治疗肺纤维化的潜在靶点.