RNA干扰下调Slug表达对肺癌细胞A549的细胞周期、增殖和侵袭的影响

• 作者: 何巍 刘佳 李巍 李玉霞
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 Slug基因 肺癌 A549细胞 增殖 细胞周期 侵袭
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 685-689
• 分类号: R734.2|R730.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2013.06.009

摘要

目的:应用RNA干扰技术下调肺癌A549细胞中Slug基因的表达,探讨其对A549细胞增殖、细胞周期和细胞侵袭能力的影响.方法:构建靶向Slug基因的shRNA真核表达质粒pGPU6-GFP-Neo-Slug,与阴性对照质粒pNeg-shRNA分别用脂质体法转染A549细胞.Real-time PCR和Western blotting验证转染后Slug mRNA和蛋白的表达.CCK-8法、流式细胞术和Transwell实验分别检测下调Slug表达对A549细胞增殖、细胞周期和侵袭能力的影响.结果:成功构建pGPU6-GFP-Neo-Slug载体并转染A549细胞,转染率达90％.与pNeg-shRNA组和空白对照组相比,pSlug-shRNA组A549细胞中Slug mRNA[(0.23 ±0.01)vs(0.97 ±0.08)、(1.0±0.09),P＜0.05]和蛋白[(0.20±0.09)vs(1.0 ±0.32)、(1.13 ±0.26),P＜0.05]表达量显著降低;细胞增殖抑制率明显上升[(35.3±5.4)％vs(1.5±0.2)％、(3.3±0.7)％,均P＜ 0.01];细胞增殖指数显著降低[(32.92±0.69)％vs(48.19±0.71)％、(42.88±0.75)％,均P＜0.05],并且处于G1期细胞数明显增多[(67.08±0.92)％ vs(52.81±0.78)％、(56.12±0.73)％,均P＜0.05];细胞侵袭能力显著降低[穿透基底膜细胞数:(55±9)vs(169±12)、(173±15),均P＜0.01].结论:pGPU6-GFP-Neo-Slug转染肺癌A549细胞能有效下调Slug基因的表达,从而抑制A549的增殖侵袭能力、阻滞细胞周期于G1期.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李巍	中国医科大学附属第一医院耳鼻喉科	82	368	10.0	15.0
2	刘佳	中国医科大学实验动物中心	55	151	6.0	9.0
3	李玉霞	沈阳医学院附属中心医院呼吸科	6	22	2.0	4.0
4	何巍	沈阳医学院附属中心医院呼吸科	15	32	3.0	5.0