体外诱导羊膜上皮细胞转分化为雌性生殖细胞的初步实验研究

• 作者: 刘小菁 吴文超 王慧 王飞 郑艾
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 羊膜上皮细胞 人卵泡液 细胞转分化 生殖细胞
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 357-361
• 语种: 中文

摘要

目的 建立体外分离、培养人羊膜上皮细胞(hAECs)的方法,研究其向雌性生殖细胞转分化的潜能.方法 体外分离、培养并鉴定hAECs后,采用添加5％人卵泡液的培养基作为诱导剂,倒置显微镜下观察细胞形态的改变,化学发光免疫技术检测培养基中雌二醇(E2)含量的变化,应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)、Western blot等方法检测雌性生殖细胞相关基因及蛋白表达水平的变化.结果 体外培养hAECs呈多角形,具有上皮细胞特有的铺路石样外观,并表达其特异性细胞角蛋白19(CK19),同时能表达胚胎干细胞(ESC)特异的转录因子POU5f1转录因子4(Oct-4).采用添加5％人卵泡液的培养基诱导14d后,对照组大部分细胞仍保持上皮细胞的多角形态,而诱导组细胞融合呈集落样生长.E2含量检测结果显示,对照组无E2生成,而诱导组E2水平从第8d开始增加,至第10d达到高峰,然后下降.RT-PCR、Western blot结果表明,诱导组生殖细胞特异性基因生长分化因子9(GDF9)、无精症缺失基因(DAZL)的mRNA表达水平明显升高(P＜0.05),而联会复合体蛋白3(SCP3)的mRNA表达水平无明显升高(P＞0.05),DAZL的蛋白表达水平亦明显增加(P＜0.05).结论 人卵泡液可在体外诱导hAECs向雌性生殖细胞方向转分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王飞	四川大学华西第二医院妇产科	28	53	4.0	7.0
2	刘小菁	四川大学华西医院再生医学研究中心心血管疾病研究室	60	316	10.0	14.0
3	郑艾	四川大学华西第二医院妇产科	41	199	8.0	12.0
4	吴文超	四川大学华西医院再生医学研究中心心血管疾病研究室	26	102	5.0	9.0
5	王慧	四川大学华西第二医院妇产科	36	135	5.0	10.0