体外诱导人羊膜上皮细胞分化为角膜上皮样细胞的初步研究

• 作者: 周清 姚敏 张晓玲 徐锦堂 杨筱曦 王文娟 陈剑
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: 人永生化角膜上皮细胞 人羊膜上皮细胞 丝裂霉素 微环境 组织工程
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 801-805
• 页数: 5页
• 字数: 5137字
• 语种: 中文

摘要

目的 探索以人永生化角膜上皮细胞(immortalized human corneal epithelial cells,ihCEC)培养液体外模拟角膜上皮细胞微环境,诱导人羊膜上皮细胞(human corneal epithelial cells,hAEC)分化为角膜上皮样细胞的可行性.方法 取(37±1)周剖宫产人羊膜组织,酶消化法提取hAEC;流式细胞仪测CD29、CD90、CD105、CD34、HLA-DR的表达.复苏培养ihCEC,以0 mg· L-1、10 mg·L-1、20 mg·L-1、30 mg·L-1、40 mg·L-丝裂霉素37℃作用2h,吸去丝裂霉素,继续培养72 h后CCK8测吸光度并计算增殖抑制率.10 mg·L-1、20 mg·L-1丝裂霉素处理细胞后12 h、24 h收集细胞培养液培养hAEC,CCK8测吸光度绘制生长曲线;收集ihCEC细胞培养液,制备条件培养基(CM)培养hAEC 10 d,倒置显微镜观察细胞形态,免疫荧光检测CK12的表达.结果 hAEC可表达CD29、CD90、D105,不表达CD34、HLA-DR;各浓度丝裂霉素组增殖抑制率分别为10 mg·L-1 (65.48％±1.03)、20 mg·L-1 (77.01％±0.99)、30 mg·L-1 (75.25％±0.71)、40 mg·L-1 (76.90％ ±0.97);20 mg·L-1丝裂霉素培养12 h收集的细胞培养液对hAEC具有明显促增殖作用;诱导分化后hAEC可表达CK12.结论 以ihCEC细胞培养液模拟的角膜上皮细胞微环境可诱导hAEC分化为角膜上皮样细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周清	暨南大学附属第一医院眼科	71	292	8.0	14.0
2	陈剑	暨南大学附属第一医院眼科	126	747	14.0	21.0
3	徐锦堂	暨南大学医学院眼科研究室	142	1284	19.0	27.0
4	杨筱曦	暨南大学附属第一医院眼科	10	55	5.0	7.0
5	王文娟	暨南大学附属第一医院眼科	2	7	1.0	2.0
6	姚敏	暨南大学附属第一医院眼科	5	56	3.0	5.0
7	张晓玲	暨南大学附属第一医院眼科	5	64	3.0	5.0