转化缺陷的R6菌株经黏膜免疫小鼠可抵抗肺炎链球菌有毒株感染

• 作者: 何於娟 刘宇思 尹一兵 张雪梅 徐绣宇 王一平 王虹 胥文春 蔡莺莺
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎链球菌 黏膜免疫 转化缺陷 疫苗
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 基础实验诊断研究
• 页码范围: 263-267
• 页数: 5页
• 分类号: R378.1
• 字数: 4218字
• 语种: 中文

摘要

目的 研制一种无转化能力的肺炎链球菌(S.pn)减毒株R6△comE,评价其作为S.pn活菌疫苗的保护效果.方法 构建comE基因缺陷的R6△comE株,评价R6、R6△comE株的转化能力及其毒力；用R6、R6△comE株分别对BALB/c小鼠进行黏膜免疫,用ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗体效价和脾细胞上清中IFN-γ、IL-4及IL-17A水平；用D39株经鼻腔黏膜感染免疫小鼠,观察生存时间和生存率.结果 成功构建comE缺陷的R6△comE株.体外转化实验中R6株转化菌量中位数为1 970 CFU/mL,体内转化实验中每只小鼠34 CFU,体内外实验中R6△comE株转化菌量均为0；感染1×10sCFU D39株的小鼠于3d内全部死亡,而感染相同剂量R6、R6△comE株的小鼠均存活＞21 d,且均于感染后72 h内清除细菌.R6、R6△comE株黏膜免疫小鼠后,血清抗体滴度的中位数(P25,P75)分别达1.0×106(6.4×105,1.8×106)、1.2×106(8.1×105,1.6×106),与相应阴性对照组比较差异有统计学意义(P均＜0.01)；与相应阴性对照组比较,R6、R6△comE株免疫组IL-4、IL-17A均升高(P均＜0.01),而IFN-γ水平差异无统计学意义(P＞0.05).黏膜免疫R6、R6△comE株的BALB/c小鼠可抵抗D39株感染,生存率分别为60％和70％.结论 R6△comE株毒力弱,无转化能力,可诱导对S.pn感染的免疫保护,是一株安全有潜力的S.pn减毒活菌疫苗.