肺炎链球菌溶血素黏膜免疫抗定植保护作用的研究

• 作者: 尹一兵 尹楠林 崔亚利 杨晓丹 王虹 袁军 龚艺
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎链球菌 ΔA146 Ply 黏膜免疫 抗定植
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 40-44
• 分类号: R378.12
• 字数: 4238字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2011.01.009

摘要

目的 原核表达ΔA146 Ply蛋白,评价ΔA146 Ply黏膜免疫对肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)在宿主鼻咽部定植的保护作用.方法 IPTG诱导、Ni-NTA树脂纯化获得纯化的ΔA146 Ply蛋白,经黏膜免疫BALB/C小鼠,制备其特异性抗血清;进行体内抗定植实验,观察小鼠鼻咽部灌洗液和肺部残存的细菌数量,检测ΔA146 Ply黏膜免疫对19F型肺炎链球菌在鼻咽部定植的保护作用.为验证该保护作用是否具有广谱性,培养血清型14型、3型、6型和2型S.pn,经鼻腔感染免疫后小鼠,评价ΔA146 Ply蛋白黏膜免疫对多株肺炎链球菌定植的保护作用.进行体外抗黏附实验,检测ΔA146 Ply蛋白及其抗血清是否对无荚膜的肺炎链球菌R6黏附A549细胞具有抑制作用.结果 获得了纯度>90%的目的蛋白;体内实验结果 显示,ΔA146 Ply黏膜免疫可以显著降低肺炎链球菌19F在宿主鼻咽部和肺部残存的细菌数量(P<0.01);14型和3型肺炎链球菌在免疫后小鼠鼻咽部及肺部定植的数量均显著下降(P<0.05),2型肺炎链球菌在免疫后小鼠肺部定植的数量显著下降(P<0.05),6B型肺炎链球菌在免疫组与对照组小鼠鼻咽部及肺部均无显著差异(P>0.05);ΔA146 Ply特异性抗血清ΔA146 Ply蛋白对R6黏附A549细胞的抑制效应呈剂量依赖性.结论 ΔA146 Ply蛋白经黏膜免疫BALB/C小鼠可以对多种血清型的肺炎链球菌在宿主鼻咽部及肺部的定植提供显著保护作用,为Ply作为肺炎链球菌疫苗候选蛋白的应用提供了实验依据.