用FRET技术研究TRPC1和Akt在细胞迁移中的相互作用

• 作者: 孟晓静 曾宏强 杨心怡 蔡春青 陈新宏
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 荧光共振能量转移 瞬时受体电位阳离子通道1 Akt 细胞迁移
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 1189-1192,封3
• 分类号: Q25
• 语种: 中文

摘要

目的 利用荧光共振能量转移(FRET)技术研究在细胞迁移过程中瞬时受体电位阳离子通道1(TRPC1)和蛋白激酶B (PKB/Akt)的相互作用.方法 构建质粒pECFP-C1-TRPC1和pEYFP-C1-Akt,并转染非洲绿猴肾细胞(cos-7 cell),用激光共聚焦显微镜观察表皮生长因子(EGF)激活cos-7细胞前后的荧光蛋白表达和分布情况,并利用FRET检测EGF刺激cos-7细胞前后的TRPC1和Akt分子间的能量转移效率(E)和相互作用距离(R).结果 在EGF激活的cos-7细胞中,TRPC1和Akt蛋白有共定位现象;分别表达融合荧光蛋白后用EGF激活cos-7细胞,可见TRPC1由胞质转位到胞膜及近膜区,Akt未发生变化;共表达融合荧光蛋白后用EGF激活cos-7细胞,TRPC1和Akt由胞质转位到胞膜及近膜区,并共定位在细胞移动方向的前极;FRET检测结果显示其能量转移效率为40％,两个分子间的作用距离为5nm.结论 在EGF激活cos-7细胞迁移过程中,TRPC1和Akt发生了FRET,表明TRPC1和Akt之间有相互作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡春青	南方医科大学公共卫生与热带医学学院	20	44	3.0	6.0
2	孟晓静	南方医科大学公共卫生与热带医学学院	15	43	4.0	6.0
3	陈新宏	南方医科大学公共卫生与热带医学学院	2	1	1.0	1.0
4	杨心怡	南方医科大学公共卫生与热带医学学院	5	9	2.0	2.0
5	曾宏强	南方医科大学公共卫生与热带医学学院	1	1	1.0	1.0