单纯疱疹病毒Ⅱ型ICP27对Vero细胞凋亡作用的研究

• 作者: 张发洲 杜华 杨慧兰 薛礼长 龙朝钦
• 来源期刊: 国际病毒学杂志
• 关键词: HSV-2 ICP27 真核表达 凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 160-165
• 页数: 6页
• 字数: 3048字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3706/cma.j.issn.1673-4092.2013.04.005

摘要

目的 探讨单纯疱疹病毒Ⅱ型转录前蛋白ICP27对Vero细胞凋亡作用及其参与细胞凋亡的可能途径.方法 用前期构建成功的pcDNA3.0-ICP27质粒瞬时转染Vero细胞,MTT法检测pcDNA3.0-ICP27转染Vero细胞的活性,Giemsa染色及流式细胞术检测转染后ICP27在细胞凋亡中的作用,实时荧光定量PCR检测Bax、Bcl-2 mRNAs的变化和对凋亡执行蛋白Caspase-3的活性的检测以探讨ICP27参与细胞凋亡的途径.结果 pcDNA3.0-ICP27转染Vero细胞后,MTT法检测发现其活性明显低于转染pcDNA3.0及空白转染的Vero细胞活性；Giemsa染色后发现转染pcDNA3.0-ICP27的Vero细胞变圆,细胞核破裂,流式细胞检测发现pcDNA3.0-ICP27转染的Vero细胞发生的凋亡率更高.凋亡执行蛋白Caspase-3的活性明显高于转染pcDNA3.0及空白对照；荧光定量PCR检测Bax、Bcl-2 mRNAs的变化,转染重组质粒的Vero细胞中Bax mRNAs表达量上调,Bcl-2 mRNAs表达降低,Bax/Bcl-2明显高于正常培养的Vero细胞及转染pcDNA3.0质粒的Vero细胞.结论 ICP27对Vero细胞有促进细胞凋亡的作用.而这种作用可能是使Bax及Bcl-2在细胞中的比例发生变化而导致的.