转宿主粘虫颗粒体病毒(PuGV-Ps)增效蛋白基因的克隆表达及活性

• 作者: 刘琴 徐健 李传明 杨青 赵松
• 来源期刊: 中国生物防治学报
• 学科: 农学
• 关键词: 转宿主粘虫颗粒体病毒 增效蛋白 克隆表达 生物测定
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 389-394
• 页数: 6页
• 分类号: S476.13|Q785
• 字数: 5013字
• 语种: 中文

摘要

以东方粘虫为转宿主增殖的颗粒体病毒(PuGV-Ps) DNA为模板通过PCR反应扩增出一条2.7 kb的特异性基因片段,纯化的PCR产物克隆到载体质粒pET-15b中,构建重组质粒pET-15b-En,重组质粒外源基因测序证明PCR扩增产物是粘虫颗粒体病毒转宿主病毒PuGV-Ps增效蛋白的全长基因.与原始美洲粘虫颗粒体病毒(PuGV)增效蛋白基因的序列比较,两者同源性达99.59％.11个突变碱基中有7个集中在5’端下游500 bp,而3’端上游500 bp仅1个碱基发生突变.PuGV-Ps增效蛋白基因重组质粒pET-15b-En转化到大肠杆菌中构建重组菌,在IPTG诱导下表达了108 kD的表达产物,Ni2+柱纯化证明表达产物是目标增效蛋白.LB培养液中加入0.2％的葡萄糖后有利于增效蛋白基因的表达.生物测定结果表明,粗提的表达产物具有增效活性,可以提高Btδ-内毒素对棉铃虫、甜菜夜蛾的敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李传明		18	67	5.0	7.0
2	杨青	中国科学院动物研究所	80	2332	26.0	47.0
3	徐健		45	260	10.0	13.0
4	刘琴		51	253	9.0	12.0
5	赵松		11	52	4.0	7.0