肿瘤坏死因子-α促进CD62E+、CD31+内皮微颗粒的释放及其机制研究

• 作者: 丁粤粤 严文华 吕海涛* 孙凌 张建敏 曹磊 贾红亮 钱为国 陈烨 黄洁
• 来源期刊: 中国血液流变学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤坏死因子-α 内皮细胞损伤 内皮微颗粒 活性氧
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 页码范围: 4-8
• 分类号: R725.4
• 字数: 4981字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-881X.2013.01.002

摘要

目的采用不同浓度的肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)体外刺激人脐静脉内皮细胞,观察TNF-α所致内皮细胞损伤及其培养上清中CD62E+、CD31+内皮微颗粒(Endothelial micro-particles,EMPs)释放水平,并初步探讨内皮细胞内的活性氧(Reactive oxygen species,ROS)在内皮微颗粒形成中的可能机制.方法倒置光学显微镜和共聚焦荧光显微镜下观察不同浓度TNF-α作用于内皮细胞24h后细胞形态和核的改变;流式细胞仪检测培养上清中CD62E+EMPs、CD31+EMPs的释放水平;荧光探针DCFH-DA法检测内皮细胞内活性氧的生成情况.结果 TNF-α可致内皮细胞形态和细胞核改变;随着TNF-α刺激浓度的增加,其培养上清中CD62E+EMPs释放水平越明显,与对照组相比,差异具有显著性(P<0.01),上清中CD31+EMPs释放水平也明显增高,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),同时CD62E+ EMPs /CD31+EMPs比值明显增大(P<0.01);随着TNF-α刺激浓度的增加,细胞内活性氧的水平升高越明显,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论不同浓度的TNF-α致损内皮细胞的程度不同,随着TNF-α刺激浓度的增加,内皮细胞的损伤程度更明显,CD62E+EMPs和CD31+EMPs释放量也相应增加,尤以CD62E+EMPs增加为甚,推测CD62E+EMPs释放水平可用来预测内皮损伤程度;推测ROS途径可能参与了内皮微颗粒形成与释放的过程.