双酚A对小鼠胚胎干细胞OCT4及SOX2基因表达的影响

• 作者: 刘庆成 匡侠锋 吴德生 周明 夏菠 杨淋清 罗凌凤 黄冠琴 龚春梅
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 关键词: 胚胎干细胞 小鼠 双酚A OCT4基因 SOX2基因
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 164-169
• 页数: 6页
• 字数: 4458字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2013.02.015

摘要

目的 探讨双酚A(bisphenol A,BPA)对小鼠胚胎干细胞(mESC)的毒性特征及OCT4、SOX2基因表达的影响.方法 分别以10-8、10-7、10-6、10-5、10-4mol/L浓度的BPA及二甲亚砜(溶剂对照组,DMSO)处理mESC系(S6)细胞24 h,重复处理3次,倒置显微镜下观察正常组、染毒组细胞的形态变化,CCK-8法检测BPA对细胞增殖的影响,计算半数抑制浓度(IC50)；分别采用real-time (RT)-Q-PCR和western-blotting技术检测BPA作用下OCT4、SOX2基因在mRNA和蛋白水平表达的变化.结果 BPA对mESC有一定的毒性作用,染毒浓度越大,细胞活性越小,二者呈剂量-效应关系,并通过计算得出BPA对mESC的IC50为4.3×10-4mol/L,同时结合BPA的环境相关暴露浓度和相关资料,最终取10-8、10-7、10-6、10-5、10-4mol/L系列浓度作为后续实验浓度；BPA处理24 h后,mESC细胞形态发生改变,较高浓度组与对照组比较,细胞数量明显减少,出现少许漂浮的细胞,克隆变得不规则,分化趋势明显.BPA浓度为10-7、10-6、10-5、10-4的OCT4mRNA相对表达量分别为1.146 ±0.087、1.156 ±0.030、1.158±0.103、1.374±0.053,均高于对照组(1.000±0.000)(t值分别为-2.384、-2.953、-3.203、-4.021,P值均＜0.05)；BPA染毒浓度为10-4 mol/L(1.113±0.052)的SOX2 mRNA相对表达水平高于对照组(1.000 ±0.000)(t=-2.765,P＜0.05).染毒浓度为10-5、10-4 mol/L的OCT4蛋白质相对表达量分别为1.360±0.168、1.602±0.151,均高于DMSO组(1.000 ±0.000),差异有统计学意义(t值分别为-3.538、-4.002,P值均＜0.05)；而各浓度组SOX2蛋白相对表达水平差异无统计学意义.结论 BPA对mESC具有一定的细胞毒性,在一定剂量范围内BPA可以使mESC OCT4基因表达增加,而对SOX2基因无明显影响.