大菱鲆趋化因子受体CCR3和CCR9基因的克隆及组织表达

• 作者: 刘晓飞 刘洋 姜志强 孟艳青 常亚青 王秀利
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大菱鲆 趋化因子受体 CCR3 CCR9 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 918-930
• 页数: 13页
• 分类号: S917
• 字数: 6866字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2013.00918

摘要

本实验克隆了大菱鲆趋化因子受体基因CCR3和CCR9的全长cDNA,并进行了鉴定。其中,全长cDNA的克隆采用了5′和3′-RACE。CCR3 cDNA全长1451 bp,包括92 bp的5′非编码区,276 bp的3′非编码区以及编码360个氨基酸的1083 bp的开放阅读框。CCR9 cDNA全长1441 bp,包括59 bp 的5′非编码区,278 bp 的3′非编码区,以及编码367个氨基酸的1104 bp的开放阅读框。两种受体均具有7次跨膜结构,符合G蛋白偶联受体的序列特征。系统进化分析表明,大菱鲆CCR3与其他鱼类CCR3聚为一支,大菱鲆CCR9也与其他鱼类的CCR9聚为一支；系统进化树显示的亲缘关系符合各物种的进化地位。实时定量 PCR (qRT-PCR)表明这两个基因在大菱鲆正常组织中均有一定量的表达,尤其是它们在头肾、脾及心脏中均有高水平的表达。在脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)诱导之后, CCR3在脾和肝中的表达水平与对照组有显著性差异(P<0.05),而 CCR9的表达水平仅在肝中与对照组有显著性差异(P<0.05)。两个基因在免疫相关组织中表达水平较高,并且能够对LPS产生免疫应答,说明它们在大菱鲆免疫系统中发挥了重要功能。