家蚕整合素基因BmintegrinαPS3的鉴定及亚细胞定位

• 作者: 崔红娟 张奎 徐曼 谈娟 陈思源
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 家蚕整合素基因 克隆 时空表达 原核表达 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2013,（22）
• 所属期刊栏目: 畜牧?兽医?资源昆虫
• 页码范围: 4808-4815
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.22.019

摘要

[目的]克隆家蚕整合素基因BmintegrinαPS3，分析其mRNA表达及亚细胞定位特征，并进行原核表达及蛋白纯化，为进一步探究 BmintegrinαPS3在家蚕中的功能奠定基础。[方法]利用 RACE 方法克隆获得BmintegrinαPS3的cDNA全长序列；采用RT-PCR方法检测BmintegrinαPS3的时空表达；在原核表达系统中表达获得BmintegrinαPS3重组蛋白；并构建BmintegrinαPS3真核表达载体，转染家蚕胚胎细胞系分析其蛋白亚细胞定位。[结果]家蚕整合素基因BmintegrinαPS3编码框全长为2895 bp，编码965个氨基酸，含有整合素家族蛋白典型的integrin alpha结构域，预测其为跨膜蛋白。构建了BmintegrinαPS3的原核表达系统，并利用亲和层析纯化获得高纯度的Bmintegrin αPS3原核表达蛋白，为进一步制备抗体获得足够的抗原。在家蚕细胞系中外源表达 Bmintegrin αPS3蛋白，显示其主要定位于细胞质和细胞膜中。另外，RT-PCR 结果显示BmintegrinαPS3mRNA 在血细胞中为特异持续表达。[结论]获得了BmintegrinαPS3的完整cDNA序列及表达特征，经原核表达、纯化获得其融合蛋白，在细胞水平上初步分析了其亚细胞定位情况。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张奎	西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室	7	15	3.0	3.0
2	崔红娟	西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室	18	82	6.0	8.0
3	徐曼	西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室	9	11	2.0	3.0
4	谈娟	西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室	8	33	4.0	5.0
5	陈思源	西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室	1	6	1.0	1.0