甘蔗与斑茅后代荧光原位杂交体系优化

• 作者: 吴嘉云 林彦铨 邓祖湖 陈如凯 黄永吉
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 甘蔗 斑茅 荧光原位杂交 预处理 变性
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1279-1286
• 页数: 8页
• 字数: 6026字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2013.11.003

摘要

高效的杂交体系是利用荧光原位杂交技术进行相关研究的基础.本研究对影响甘蔗染色体荧光原位杂交效果的关键因素如染色体预处理、变性条件和变性方式等进行筛选,优化适合于甘蔗的荧光原位杂交体系.本研究以甘蔗Saccharum officinarum)与斑茅(Erianthus arundinaceus)F1崖城96-66的根尖为材料,采用对二氯苯离体、α-溴代萘离体和4℃低温水中非离体3种预处理方法,筛选染色体形态,采用分开变性和共变性两种变性方式并结合筛选合适的变性温度(设置70、80、90和98℃共变性与60、70、80和90℃分开变性),比较其杂交信号效果.结果表明,采用对二氯苯离体预处理,染色体形态呈粗短型,适用于以甘蔗基因组原位杂交计数来探讨染色体遗传模式的研究;采用α-溴代萘离体预处理和4℃低温水中非离体预处理,染色体形态较长,缢痕较明显,适用于染色体基因定位和核型分析等研究;80℃共变性和70～80℃的温度范围分开变性的杂交效果较佳;据筛选结果采用探针和染色体分开变性,染色体变性温度为80℃优化基因组原位杂交的体系来检验效果,α-溴代萘饱和水溶液预处理后所得的染色体较为分散,形态相对较长,45S rDNA定位信号强且分辨率高;对二氯苯饱和水溶液预处理后所得的染色体分散,形态较短小,荧光信号均一,说明优化的体系效果好.本研究为进一步开展相关的染色体荧光原位杂交提供技术平台,为甘蔗近缘属野生种质利用提供技术支撑,为远缘杂交后代材料的分子细胞遗传学深入研究提供基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈如凯	福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室	125	1780	20.0	34.0
2	林彦铨	福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室	21	365	11.0	18.0
3	邓祖湖	福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室	18	248	7.0	15.0
4	吴嘉云	福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室	3	21	2.0	3.0
8	黄永吉	福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室	5	16	3.0	4.0