黄花菜染色体制片及荧光原位杂交技术体系的建立

• 作者: 李子瑜 李森 武丹阳 武江
• 来源期刊: 山西农业大学学报(自然科学版)
• 关键词: 黄花菜 染色体制片 根尖中期细胞 花粉母细胞粗线期 荧光原位杂交
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 作物
• 页码范围: 13-20
• 页数: 8页
• 分类号: S682
• 语种: 中文
• DOI: 10.13842/j.cnki.issn1671-8151.202006069

摘要

[目的]黄花菜(Hemerocallis citrina Barni)是我国特有的经济型蔬菜,目前急需加速分子育种进程,开发遗传学平台.本文旨在优化黄花菜染色体制片技术,构建黄花菜荧光原位杂交体系,为遗传图谱与物理图谱的整合提供技术基础.[方法]以大同黄花菜(H.cv.'DatongHuanghua')为研究材料,分别对中期根尖细胞和粗线期花粉母细胞的制片方法进行优化,同时以拟南芥45S rDNA和5S rDNA序列为探针,筛选和优化黄花菜荧光原位杂交体系技术参数.[结果]中期染色体制片最佳体系:2.9μg·mL-1浓度的八羟基喹啉溶液处理4 h,混合酶液(纤维素酶:果胶酶=2:1)37℃酶解160 min;粗线期染色体制片最佳体系:采集4～5 mm龄段花蕾,卡诺固定液4℃固定24 h后,混合酶液(纤维素酶:果胶酶=2:1)37℃酶解220 min,使用改良火焰干燥法,均可得到理想制片.采用直接标记法对45S rDNA和5S rDNA探针序列进行荧光标记,结果显示杂交信号清晰稳定,背景干扰小.[结论]本研究构建并优化了黄花菜染色体制片技术及荧光原位杂交体系,可为黄花菜细胞遗传学研究和基因组研究的深入开展提供技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李森		18	51	5.0	5.0
2	武江		3	12	2.0	3.0
3	李子瑜		1	0	0.0	0.0
4	武丹阳		1	0	0.0	0.0