锥虫蓝直接染色法鉴定人羊膜细胞活力方案研究

• 作者: 刘亮 吕礼芳 朱富军 杨文贤 王磊 童亚林 詹球 辛海明
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 关键词: 锥虫蓝 着色剂 羊膜 时间因素 浓度因素
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 短篇论著
• 页码范围: 312-314
• 页数: 3页
• 字数: 2311字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2013.03.020

摘要

目的 摸索锥虫蓝直接染色法在人羊膜细胞活力快速鉴定中的适宜浓度及染色时间.方法 取健康剖宫产产妇的胎膜6张,浸泡后分离羊膜并剪成1 cm×1 cm备用.(1)取部分制备好的羊膜分别浸泡于1、2、3、4 g/L4种浓度的锥虫蓝溶液中,每个浓度下各浸泡1、3、4、10 min后取出,在PBS中漂洗30s,更换PBS,继续漂洗30 s.存光学显微镜下选取4个视野拍照,每个视野计数1000个细胞,同时计数蓝染细胞计算细胞死亡率.(2)另取部分制备好的羊膜浸泡于0.5 g/L氯己定1h后行锥虫蓝直接染色,锥虫蓝溶液浓度与染色时间为前一实验结果选定的浓度、时间,并与1 g/L锥虫蓝染色10 min对比.后续操作及检测同前一试验.对数据行两因素析因设计方差分析、Duncan多范围检验及LSD检验. 结果 (1)1、2、3 g/L锥虫蓝染色1、3 min后细胞死亡率相近(P值均大于0.05),染色4、10 min后细胞死亡率明显高于1、3 min(P值均小于0.05).4 g/L锥虫蓝染色1、3、4 min后细胞死亡率相近(P值均大于0.05),染色10 min后细胞死亡率显著高于1、3min(P值均小于0.05).锥虫蓝浓度为2、3、4 g/L时,各时相点细胞死亡率都显著高于1 g/L(P值均小于0.05).(2)对经0.5 g/L氯己定浸泡1h羊膜染色显示,1 g/L锥虫蓝染色1 min细胞死亡率[(72.6±7.4)％]显著低于预计死亡率(100.0％,P ＜0.05),染色3 min细胞死亡率[(95.3±5.6)％]、染色10 min细胞死亡率[(99.8±5.0)％]与预计死亡率相近(P值均大于0.05). 结论 锥虫蓝直接染色法鉴定人羊膜细胞活力的适宜方案为浓度1 g/L,染色时间3 min.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	詹球	解放军第一八一医院动物实验室	6	9	2.0	3.0
2	王磊	广西师范大学生命科学学院	17	62	3.0	7.0
3	刘亮	广西师范大学生命科学学院	22	28	3.0	4.0
4	童亚林	解放军第一八一医院烧伤整形科	28	92	5.0	8.0
5	辛海明	解放军第一八一医院烧伤整形科	7	16	3.0	4.0
6	朱富军	解放军第一八一医院烧伤整形科	6	9	2.0	3.0
7	吕礼芳	解放军第一八一医院动物实验室	4	3	1.0	1.0
8	杨文贤	广西师范大学生命科学学院	1	3	1.0	1.0