高糖及糖基化终末产物对视网膜Müller细胞缺氧诱导因子-1α介导缺氧信号通路的影响

• 作者: 万李 宋明霞 张梅 方杨 谢学军
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: 糖基化终末产物 视网膜Müller细胞 低氧诱导因子-1α 血管内皮生长因子 脯氨酸羟化酶
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1101-1105
• 页数: 5页
• 字数: 6227字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨高糖以及糖基化终末产物(advanced glycationend products,AGEs)对体外培养的视网膜Müller细胞低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)-1α介导缺氧信号通路的影响.方法 采用改进的酶消化法培养新生5-7 dSD大鼠视网膜Müller细胞,纯化培养至第2代后,以2×106 mL-1密度接种于48孔培养板中,根据培养液中葡萄糖及AGEs含量不同,分为正常组、模拟高糖组(葡萄糖终浓度为50 mmol·L-1)、低AGEs及高AGEs组(培养液AGEs终浓度分别为50 mg·L-1、100 mg·L-1),每组设6个复孔,干预48 h后,以ELISA法测定细胞培养上清液中HIF-1α、血管内皮生长因子(vascular endothe-lial growth factor,VEGF)蛋白表达量以及脯氨酸羟化酶(proline hydroxylase domain,PHD)1、2、3的活性;以RT-PCR测定Müller细胞HIF-1αmRNA及VEGF mRNA相对内参的表达量.结果 高AGEs组HIF-1α蛋白表达量为(3.248±0.404) μg·L-1,明显高于正常组的(2.577±0.158) μg·L-1及高糖组的(2.600 ±0.131) μg·L-1,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);低AGEs组HIF-1α mRNA相对表达量为3.205±0.865,明显高于高糖组的2.438±0.444及高AGEs组的1.935±0.191,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);正常组VEGF蛋白含量和VEGF mRNA的相对表达量分别为(532.249±19.922) μg·L-1和1.348±0.314,均低于高糖组的(566.661±24.979) μg·L-1和2.265±0.677、低AGEs组的(590.565±29.725) μg·L-1和2.001±0.574及高AGEs组的(593.646±16.339) μg·L-1和2.063±0.759,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).正常组PHD1活性为(99.969±11.066)μg·L-1,高于高糖组的(80.987±5.910) μg·L-1、低AGEs组的(88.809±6.303) μg·L-1及高AGEs组的(75.519±4.914) μg·L-1,而低AGEs组PHD1活性高于高AGEs组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);PHD2活性正常组为(131.266±2.614) μg·L-1,低于低AGEs组的(142.896±8.323) μg·L-1及高AGEs组的(149.998±15.013) μg·L-1,差异均有统计学意义(均为P ＜0.05);PHD3在各组之间差异均无统计学意义(P=0.066).结论 AGEs比高糖更能诱导视网膜Müller细胞HIF-1α的高表达,且HIF-1α的表达强度与AGEs浓度有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢学军	成都中医药大学临床医学院眼科	105	527	14.0	19.0
2	张梅	成都中医药大学临床药学院	74	753	16.0	24.0
3	万李	成都中医药大学临床医学院眼科	18	134	7.0	11.0
4	方杨	成都中医药大学临床医学院眼科	8	19	2.0	4.0
5	宋明霞	中国人民解放军第401医院眼科	1	14	1.0	1.0