白色念珠菌3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆及表达

• 作者: 李昂 石建峰 苗群爱 袁雪岩 赵珊梅
• 来源期刊: 北京口腔医学
• 学科: 医学
• 关键词: 白色念珠菌 3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH) 原核表达 SDS-PAGE Western Blotting
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 257-260
• 页数: 4页
• 分类号: R780.2
• 字数: 2885字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建白色念珠菌3-磷酸甘油醛脱氧酶(GAPDH)的表达载体并使其在大肠杆菌中正确表达.方法 提取基因组总RNA,PCR方法获得GAPDH基因,构建其原核表达质粒pET-32a(+)-GAPDH,转化大肠杆菌BL21菌株,经IPTG诱导产生蛋白,用SDS-PAGE和Western Blotting检测GAPDH蛋白表达情况.结果 构建的白色念珠菌GAPDH基因表达质粒经序列测定证实,与GenBank数据完全一致.双酶切鉴定证实,克隆基因正确插入pET-32a(+)载体.在1.0 mmol·L-1的IPTG浓度诱导下表达,可观察到相对分子量51kDa的蛋白,经SDS-PAGE和Western Blotting检测证实为GAPDH蛋白.结论 实验成功克隆白色念珠菌GAPDH基因,并在大肠杆菌中正确表达,为白色念珠菌感染的候选疫苗奠定工作基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李昂	710004西安 西安交通大学口腔医院牙周黏膜科	81	451	12.0	17.0
3	袁雪岩	陕西省交通医院口腔科	5	13	2.0	3.0
4	石建峰	西安交通大学口腔医院口腔医学研究中心	28	97	6.0	7.0