兔卵母细胞孤雌激活及不同添加物对激活胚胎发育的影响

• 作者: 唐艳萍 姜晓丹 尚江华 秦玲莎 邹雨汐
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 胚胎发育 孤雌激活 卵母细胞
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 29-33
• 页数: 5页
• 分类号: Q132.4
• 字数: 4136字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2013.01.007

摘要

目的 探寻一种稳定有效的卵母细胞激活方法及体外培养体系,为下一步的治疗性克隆胚激活及培养实验提供相关参照. 方法 (1)选取具有第一极体的成熟兔卵母细胞随机分组,比较1.2 kV/cm、1.6 kV/cm、2.0 kV/cm场强的电激活及5μg/mL离子霉素(ION)激活对兔卵母细胞孤雌激活效果；(2)激活处理后的卵母细胞,分别在添加0、10、20、40、80 ng/mL白血病抑制因子(LIF)及添加0、1×、2×胰岛素、转铁蛋白、硒化钠复合物(ITS)的M199液中培养,比较孤雌胚胎的卵裂率、8-16细胞胚胎比例、桑囊率以及囊胚细胞总数情况. 结果 (1)不同激活方式对兔卵母细胞的激活效果差异较大.ION处理组存活率高于2.0 kV/cm电激活处理组,差异有统计学意义(P＜0.05)；而在分裂率、8-16细胞率、桑囊率上,ION处理组高于1.2 kV/cm电激活处理组,差异有统计学意义(P＜0.05).(2) 20 ng/mL LIF组桑囊率高于80 ng/mL LIF组,差异有统计学意义(P＜0.05).在囊胚细胞总数上,20 ng/mL LIF组高于40 ng/mL LIF和80 ng/mL LIF组,差异有统计学意义(P＜0.05).1×ITS组的桑囊率高于2×ITS组,差异有统计学意义(P＜0.05).此外,0×ITS组及1×ITS组的囊胚细胞总数分别为166.00枚、147.40枚,多于2×ITS组(78.00枚),差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 ION处理激活新西兰大白兔卵母细胞能获得较好的分裂率和囊胚率；添加20 ng/mL LIF、1 ×ITS可以促进兔孤雌激活胚胎的后期发育.