猪主动脉内皮细胞株的建立和鉴定

• 作者: 姜楠 张勇 张卓超 曹阳 李伟民 李霄 王建锋 王德益 窦科峰 韩炜
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 猪 内皮细胞 异种移植
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 265-267,封3
• 页数: 4页
• 字数: 3379字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2013.02.022

摘要

目的 建立猪主动脉内皮细胞株,为以猪为供体的异种移植研究提供必要的细胞水平研究平台.方法 分离健康幼猪主动脉内皮细胞并用携带链霉素抗性和猿猴病毒40大T抗原(SV40LT)基因的慢病毒转染细胞.检测SV40LT基因和α-1,3-半乳糖转移酶(α-1,3-GT)基因和d-1,3-半乳糖抗原表达.最后测定2类细胞与人血清发生反应的能力.结果 聚合酶链反应(PCR)结果显示,SV40LT基因在转染后细胞内高表达(P＜0.05).原代细胞倍增时间约为21 h,而细胞株倍增时间约18h.2类细胞均具有吞噬低密度脂蛋白(LDL)和表达血管性假性血友病因子(vWF)因子特性(P＞0.05).α-1,3-GT基因和α-1,3-半乳糖抗原在2类细胞内表达均无差异[荧光强度分别为(498.2±3.5)和(500.6±3.2),P＞0.05].与人血清共培养时,随血清浓度升高,2类内皮细胞的增殖能力下降、细胞凋亡率增加,并均可结合人IgM抗体、C3和C5b-9 (P ＞0.05).结论 猪动脉内皮细胞株具有与原代内皮细胞相同的形态结构和表型特征,并具有和人血清发生免疫反应的能力.