Plcd1转基因小鼠的制备

• 作者: 俞利平 刘桂杰 吴宝金 张艳丽 李高天 杨伟伟 殷筱舒 殷黎静 顾美儿
• 来源期刊: 杭州师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: Plcd1 pEF6/V5-His-Plcdl 显微注射 转基因小鼠
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 特约稿
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4865字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-232X.2013.01.001

摘要

通过制备Plcd1转基因小鼠研究Plcdl基因功能.首先逆转录PCR获得约2.2 kb的Plcd1基因全长,T载体克隆后测序验证；以pMD19-T-Plcd1为模板,通过设计引物及PCR扩增引入酶切位点,与pEF6/V5-His同时进行酶切、连接,构建pEF6/V5 His-Plcd1表达载体；经真核表达验证后,酶切获得目标片段,显微注射681枚受精卵,在82只仔鼠中获得转基因阳性首建鼠15只,其中13只稳定遗传并建系.PLCD1-HIS融合蛋白在睾丸组织中表达,在皮肤组织中无表达.Plcd1转基因小鼠为Plcd1功能研究奠定了基础.