产气荚膜梭菌菌落多重PCR方法的建立及初步应用

• 作者: 姜艳芬 杨晓静 杨柳 沈晶 苗承霞 董洁 许信刚
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 产气荚膜梭菌 菌落多重PCR 血清型
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 1842-1847
• 分类号: S855.1
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中已发布的产气荚膜梭菌α、β、ε、ι毒素基因序列,分别设计并合成针对4种毒素基因的特异引物,通过优化多重PCR反应条件,建立1种简单的产气荚膜梭菌定型菌落多重PCR方法.结果显示:A、B、C、D、E5型产气荚膜梭菌参考菌株均扩增出了相应的预期目的条带,而大肠杆菌、巴氏杆菌和芽孢杆菌则均未能扩增出相应条带;将单个菌落稀释100倍,仍能扩增出相应的目的片段,该方法对B型和E型参考菌株最低检测量分别为2.6×104 cfu/mL、1.2×104 cfu/mL.应用该多重PCR方法从106份样品中检测到30株产气荚膜梭菌且均为A型,其中病死鸡的盲肠内容物分离率为36.5％(19/52),健康鸡群新鲜粪便样品分离率为20.4％ (11/54).本研究建立的多重PCR方法特异性强,敏感度高,重复性好,可以有效进行产气荚膜梭菌的快速检测及5种血清型的鉴别,对产气荚膜梭菌的感染及食品安全问题的研究均具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许信刚	西北农林科技大学动物医学院	116	501	10.0	14.0
2	董洁	西北农林科技大学动物医学院	5	138	5.0	5.0
3	姜艳芬	西北农林科技大学动物医学院	29	238	10.0	14.0
4	杨柳	西北农林科技大学动物医学院	15	122	5.0	11.0
5	杨晓静	西北农林科技大学动物医学院	1	10	1.0	1.0
6	苗承霞	西北农林科技大学动物医学院	1	10	1.0	1.0
7	沈晶	西北农林科技大学动物医学院	1	10	1.0	1.0