苜蓿原生质体电融合适宜条件的筛选

• 作者: 师尚礼 张凌云
• 来源期刊: 草地学报
• 学科: 农学
• 关键词: 苜蓿 原生质体 细胞融合 电融合 适宜条件
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 769-775
• 页数: 7页
• 分类号: S336|Q813.2
• 字数: 6411字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11733/j.issn.1007-0435.2013.04.021

摘要

为改良培育苜蓿(Medicago)新品种,拟建立苜蓿原生质体融合体系.通过电融合方法,使俄罗斯杂花苜蓿(M.varia)原生质体和甘农4号紫花苜蓿(M.sativa‘Gannong No.4’)原生质体进行非对称融合,获得了杂交细胞,研究不同失活处理条件、电场条件、原生质体密度对苜蓿原生质体融合的影响.结果表明:经过紫外灯辐射5min的俄罗斯杂花苜蓿原生质体和6 mmol· L-1 IOA处理的甘农4号紫花苜蓿原生质体,密度调至3×105～5×105个·mL-1,以交流电场强度15～20 V·cm-1、交流频率2000～2500 kHz,直流脉冲场强200～250 V·cm-1、脉冲宽幅40 μs、脉冲个数为3的条件为最适电融合条件,此时一对一有效融合率最高可达13.8％.