稳定干扰核糖体蛋白RPS7基因表达的宫颈癌HeLa细胞株的建立

• 作者: 丁慧 凌静娴 刘宝瑞 张葵 王庆飞 禹立霞
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RPS7基因 shRNA 逆转录病毒载体 宫颈癌
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 318-322
• 页数: 5页
• 分类号: R737.33
• 字数: 3385字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2013.06.002

摘要

目的 建立稳定抑制RPS7基因表达的宫颈癌HeLa细胞株.方法 设计并合成靶向人RPS7基因的shRNA寡核苷酸片段,克隆到逆转录病毒载体pSIREN中,构建重组质粒pSIREN-RPS7-shRNA,转染293T细胞,将包装产生的重组逆转录病毒感染宫颈癌HeLa细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定的细胞克隆,用real-time PCR和Western印迹检测细胞中RPS7 mRNA和蛋白表达水平.结果 获得了经测序鉴定正确的重组逆转录病毒质粒,逆转录病毒感染HeLa细胞后用嘌呤霉素筛选出的稳定细胞中,RPS7 mRNA和蛋白水平均显著低于干扰对照细胞.结论 成功构建了靶向人RPS7基因的shRNA逆转录病毒载体,建立了稳定抑制RPS7基因表达的宫颈癌HeLa细胞株,为进一步研究RPS7在宫颈癌中的生物学功能和作用机制提供了可靠的细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘宝瑞	南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤科	304	2126	23.0	31.0
2	张葵	南京大学医学院附属鼓楼医院检验科	154	788	14.0	19.0
3	禹立霞	南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤科	63	588	15.0	22.0
4	凌静娴	南京大学医学院附属鼓楼医院妇科	21	95	5.0	9.0
5	王庆飞	南京大学医学院附属鼓楼医院检验科	10	17	2.0	3.0
6	丁慧	南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤科	14	58	4.0	7.0