土壤大丽轮枝菌微菌核的快速定量检测

• 作者: 余真真 商文静 徐向明 杨家荣 胡小平 魏锋
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大丽轮枝菌 微菌核 水筛法 实时荧光定量PCR 棉花黄萎病
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 病原学
• 页码范围: 449-457
• 页数: 9页
• 分类号: S432.4
• 字数: 5776字
• 语种: 中文

摘要

微菌核是大丽轮枝菌在土壤中的主要存活结构和黄萎病的初侵染来源.对土壤中大丽轮枝菌微菌核进行定量是黄萎病监测和预警的基础.本研究以大丽轮枝菌Internal Transcribed Spacer (ITS)区特异性引物对P1/P2扩增产物的重组质粒为标准品,构建SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR反应的标准曲线,结合土样水筛法建立了土壤大丽轮枝菌微菌核定量检测体系.同时,建立了土壤中微菌核数量与棉花黄萎病发病率的关系模型.结果表明,实时定量PCR检测灵敏度比常规PCR高10倍,检测下限为1个微菌核/克土,在5.54×102 ～ 5.54×107copies范围内,DNA拷贝数的对数值与Ct值具有良好的线性关系.建立的土壤中微菌核个数n与Ct值之间的关系为n=e 7.3-Ct/3.905.温室人工接种微菌核数量与棉花黄萎病发病率间的线性关系为y =2.710n +0.251.