体外扩增对食管癌患者NK细胞表面受体表达及其抑瘤活性的影响

• 作者: 叶韵斌 周智锋 李洁羽 柳硕岩 王枫 郑庆丰
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: NK细胞 活化性受体 抑制性受体 白细胞介素 肿瘤细胞
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 330-335
• 分类号: R735.1|R730.54|R730.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2013.03.013

摘要

目的:探讨食管癌患者NK细胞扩增前后的受体表达及其对肿瘤细胞的杀伤.方法:收集福建省肿瘤医院食管癌患者外周血20例,健康供者(对照组)外周血10例.NK细胞培养采用细胞因子(IL-2+ IL-12 +IL-15+ IL-18)组合,流式细胞术检测NK细胞免疫表型及其受体(CD56+、CD69+、NKG2D、NKp30、NKp44、NKp46、CD158b、CD159a)的表达,LDH法检测不同效靶比时NK细胞对多种肿瘤细胞株(K562、Raji、Eca-109、TE-1)的杀伤作用.结果:与对照组相比,食管癌患者外周血CD3+、CD4+细胞比例以及CD4 +/CD8+T细胞比值明显降低(P＜0.05),NK细胞(CD3-CD56+)及调节性T细胞(Treg)比例明显升高(P＜0.05).经细胞因子IL-2+ IL-12+ IL-15+ IL-18组合定向扩增20 d后,食管癌患者NK细胞比例高达90％以上,NK细胞数扩增达1 000倍以上(P＜0.01)；而CD3+T细胞、CD4+、CD8+T细胞、CD19+B细胞、Treg细胞及单核巨噬细胞(CD14+)比例均显著降低(P＜0.01),且食管癌患者与对照组之间无统计学差异(P＞0.05).经细胞因子体外培养20 d后,NK细胞表面CD69及活化性受体(NKG2D、NKp30、NKp44、NKp46)均明显上调,而抑制性受体(CD158b、CD159a)均明显下调(P＜0.05).培养20 d后,食管癌患者NK细胞对肿瘤细胞K562、Raji、Eca-109、TE-1的杀伤能力均显著高于培养前[(69.2±5.1)％vs(42.3±3.0)％,(44.6±3.2)％vs(21.1±2.0)％,(69.7±3.9)％vs(50.3±3.5)％,(67.1±4.5)％vs(41.2±3.3)％；均P＜0.01].结论:细胞因子IL-2+ IL-12 +IL-15 +IL-18组合能有效扩增外周血NK细胞并上调其活并性受体的表达、下调抑制性受体的表达,其数量及功能均能满足临床治疗需要.