RNA干扰茄病镰刀菌ALP基因及其基因沉默菌株的制备

• 作者: 何宏 刘珂凤 喻文倩 梁涛 王婷 赵桂秋
• 来源期刊: 中国真菌学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 茄病镰刀菌 真菌性角膜炎 丝氨酸蛋白酶 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 10-13,19
• 页数: 5页
• 分类号: R379.9
• 字数: 3293字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建RNA干扰质粒载体抑制茄病镰刀菌碱性丝氨酸蛋白酶(ALP)基因,通过检测ALP的表达及酶活性变化筛选出基因沉默菌株.方法 构建2个ALP的干扰载体,转化茄病镰刀菌孢子,获得ALP基因沉默菌株△ALP1、△ALP2,通过RT-PCR检测△ALP1、△ALP2的ALP基因mRNA变化,并通过蛋白琼脂廓清率培养基检测ALP酶活性变化,对所得菌株的毒力进行判断.结果 RNA干扰后所获基因沉默菌株中,ALP的mRNA表达量显著低于标准茄病镰刀菌株(F =184.67,P＜0.01),其中△ALP2抑制效果较好、酶活性显著低于标准菌株及△ALPI(q=5.276、5.463,P＜0.01).结论 通过LiAc转化法对茄病镰刀菌ALP进行RNA干扰,可有效抑制茄病镰刀菌ALP的表达；ALP基因沉默茄病镰刀菌株的获取,为进行动物体内实验、深入研究ALP在茄病镰刀菌性角膜炎发病机制中的作用、探索新型治疗方法提供思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵桂秋	青岛大学医学院附属医院眼科	177	834	14.0	20.0
2	梁涛	青岛大学医学院附属医院眼科	35	121	6.0	9.0
3	何宏	青岛大学医学院附属医院检验科	48	274	8.0	15.0
4	王婷	青岛大学医学院附属医院眼科	24	51	4.0	6.0
5	刘珂凤	青岛大学医学院附属医院眼科	3	3	1.0	1.0
6	喻文倩	青岛大学医学院附属医院眼科	3	3	1.0	1.0