沉默AQP-5对人结肠癌HT-29细胞的增殖、凋亡及其化疗敏感性的影响

• 作者: 吕柏楠 吴胜春 唐雷 杨永宾 石晓明
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 水通道蛋白5 结肠肿瘤 RNA干扰 化疗敏感性 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 306-311
• 分类号: R735.4|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2013.03.009

摘要

目的:探讨小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)沉默水通道蛋白-5(aquaporin-5,AQP-5)的表达对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及化疗药敏感性的影响.方法:以合成的AQP-5-siRNA序列转染HT-29细胞,采用Western blotting检测AQP-5-siRNA的转染效率,磺酰罗丹明(sulphorhodamine B,SRB)染色法检测各组细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测HT-29细胞的凋亡.分光光度法检测HT-29细胞caspase-3活性,real-time PCR和Western blotting检测AQP-5-siRNA转染后HT-29细胞中PCNA和P53在mRNA和蛋白水平的表达.选用5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)和顺铂(cisplatin,DDP)刺激AQP-5-siRNA转染细胞,SRB染色法检测细胞的增殖抑制率,以金正均法计算两药联合作用的Q值.结果:与NC-HT-29细胞相比,AQP-5-siRNA-HT-29细胞中AQP-5蛋白的表达显著下降(P＜0.05).SRB检测显示,AQP-5-siRNA-HT-29细胞的增殖抑制率显著增加[(9.23±0.51)％vs0,P＜0.05].流式细胞术检测显示,AQP-5-siRNA-HT-29细胞的凋亡率显著升高[(10.81±1.32)％vs(0.99±0.18)％,P＜0.05]；caspase-3活性显著升高[(0.19±0.03)vs(0.09±0.01),P＜0.05].Real-time PCR和Western blotting结果显示,AQP-5-siRNA-HT-29细胞中PCNA mRNA和蛋白表达明显下降(P＜0.05),同时,P53 mRNA和蛋白表达明显上升(P＜0.05).AQP-5-siRNA+ 5-FU组细胞的增殖抑制率显著高于AQP-5-siRNA组和5-FU组[(44.93±2.28)％vs(9.11±0.32)％、(25.68±1.71)％,均P＜0.05],AQP-5-siRNA+ DDP组细胞的增殖抑制率显著高于AQP-5-siRNA组和DDP组[(39.01±1.76)％vs (9.11±0.32)％、(18.47±1.25)％,P＜0.05],而且,AQP-5-siRNA与5-FU或DDP联用的Q值分别为1.38和1.51,均表现为协同作用.结论:AQP-5-siRNA能抑制HT-29细胞增殖、促进其凋亡、并提高HT-29细胞对5-FU和DDP的化疗敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴胜春	河北省人民医院普外二科	45	111	6.0	7.0
2	石晓明	河北省人民医院普外二科	56	118	6.0	6.0
3	唐雷	河北省人民医院普外二科	31	80	5.0	7.0
4	杨永宾	河北省人民医院普外二科	33	75	5.0	6.0
5	吕柏楠	河北省人民医院普外二科	44	91	5.0	6.0