负性共刺激分子B7-H4赋予肾癌细胞对化疗药物的耐药性研究

• 作者: 宋慧 李金美 章良 练启慧 谢炜 陈敏吉
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: B7-H4 肾癌细胞 5-氟尿嘧啶 核定位序列 耐药性
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 553-558
• 页数: 6页
• 分类号: R392
• 字数: 3412字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20130613

摘要

通过RT-PCR方法克隆出人野生型负性共刺激分子B7-H4基因,将目的片段双酶切(EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ)后,与pIRES2-EGFP真核表达载体连接,构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-B7-H4-WT并进行鉴定;然后用定点突变法构建B7-H4核定位序列突变体基因,再构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-B7-H4-NLS-MT;脂质体转染法将重组载体导入786-O细胞,CCK8法研究转基因细胞株的增殖率及对化疗药物5-氟尿嘧啶、阿霉素和顺铂的耐药性.结果显示:B7-H4野生型转基因细胞株相较于空白质粒组,可有效促进786-O细胞增殖,并赋予786-O细胞对3种化疗药物的耐药性.与空白质粒组相比,对5-氟尿嘧啶的耐药倍数为2.06,对阿霉素的耐药倍数为1.81,对顺铂的耐药倍数为1.72.机制研究显示B7-H4野生型可赋予肿瘤细胞抗凋亡作用,1.25 μg,/mL 5-氟尿嘧啶引起B7-H4 WT/786-O的细胞的凋亡率是20.2％,而Mock/786-O和B7-H4 NLS/MT/786-O细胞的凋亡率分别是41.1％和35.1％.说明B7-H4可能通过调控细胞凋亡赋予肿瘤细胞多药耐药性.当B7-H4核定位序列被突变后,这些功能都消失,说明B7-H4促肿瘤细胞增殖、赋予其多药耐药性的功能与其核定位序列密切相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢炜	苏州大学医学部基础医学与生命科学学院免疫学系	18	146	6.0	11.0
2	章良	苏州大学医学部药学院	17	43	4.0	6.0
3	李金美	苏州大学医学部药学院	1	1	1.0	1.0
4	宋慧	苏州大学医学部药学院	2	6	1.0	2.0
5	练启慧	苏州大学医学部药学院	2	6	1.0	2.0
6	陈敏吉	苏州大学医学部药学院	2	6	1.0	2.0