稳定表达磷酸化Stat3蛋白的EC-1细胞株的获取

• 作者: 宋一民 李刚 李珊珊 李蕴蕴 王志强 贺红柳 轩小燕
• 来源期刊: 郑州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 食管鳞状细胞癌 EC-1细胞 pXJ40-Stat3 磷酸化Stat3蛋白 转染
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 食管癌研究
• 页码范围: 297-300
• 页数: 4页
• 分类号: R735.1
• 字数: 2401字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2013.03.001

摘要

目的:建立稳定表达磷酸化Stat3(p-Stat3)蛋白的EC-1细胞株.方法:应用脂质体Lipofectamine 2000将pXJ40-Stat3质粒转染入EC-1细胞中,G418筛选得稳定转染pXJ40-Stat3的EC-1细胞株,IL-6处理20 min以获得稳定表达p-Stat3蛋白的EC-1细胞株(转染pXJ40-Stat3+IL-6处理组).同时以稳定转染pXJ40-Stat3(转染pXJ40-Stat3组)、IL-6处理组(不转染)、空载体组和空白组细胞作为对照.分别用RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中Stat3 mRNA和 p-Stat3蛋白的表达.结果:5组细胞中Stat3 mRNA和 p-Stat3表达差异有统计学意义(FStat3 mRNA=5.971,P=0.010;Fp-Stat3=7.334,P=0.005).转染pXJ40-Stat3+IL-6处理组EC-1细胞中Stat3 mRNA表达最高(0.72±0.01),其次是转染pXJ40-Stat3组(0.65±0.01),均高于其他3组.转染pXJ40-Stat3+IL-6处理组EC-1细胞中p-Stat3蛋白表达最高(0.72±0.03),其次为IL-6处理组(0.65±0.01),均高于其他3组.结论:成功建立稳定表达p-Stat3蛋白的EC-1细胞株.